 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 3 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 738 | 回復(fù): 2 | ||
thestormcong銀蟲 (小有名氣)
|
[求助]
二次pcr產(chǎn)物
|
|
大家好，現(xiàn)在在做red基因敲除。最近在準(zhǔn)備打靶片段。我的第一輪pcr產(chǎn)物切膠回收，dpnI酶切，再次切膠回收。本來是用來打靶的，可是電泳后發(fā)現(xiàn)亮度不夠。于是就想以該產(chǎn)物為模板，進(jìn)行二次pcr，可是二次pcr后沒有發(fā)現(xiàn)目的條帶，糾結(jié)。 圖一：第一道為打靶片段（切膠回收，酶切，再次切膠回收，上樣量2ul） 中間道為宿主里的pkd46質(zhì)粒（我加大了提取量），第三道m(xù)arker，從下往上marker分別為750,1000,2000bp。marker的濃度為50ng/5ul（我上樣5ul）。大家覺得我這樣的濃度可行嗎？如果不行的話我就要重做一次 圖二：二次pcr產(chǎn)物后的條帶，marker最下方兩條為200，100bp。 戰(zhàn)友們有沒有得到高濃度打靶片段的方法，我現(xiàn)在的想法是想以打靶片段為模板進(jìn)行二次pcr，因?yàn)檫@樣會節(jié)省一點(diǎn)dpnI，dpnI好像一根用不了幾次。 可是二次pcr得不到產(chǎn)物了。糾結(jié)。。。。。 大家給點(diǎn)建議吧，先行謝過��！ 圖一 圖二 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有225人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
thestormcong
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 462.1
- 紅花: 3
- 帖子: 103
- 在線: 109.2小時(shí)
- 蟲號: 1410070
- 注冊: 2011-09-20
- 專業(yè): 生物化學(xué)
2樓2012-04-12 12:15:05
cheng_xiao
木蟲 (小有名氣)
- MolEPI: 2
- 應(yīng)助: 59 (初中生)
- 金幣: 3645.2
- 帖子: 273
- 在線: 62.7小時(shí)
- 蟲號: 1553648
- 注冊: 2011-12-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 植物遺傳學(xué)
3樓2012-04-12 14:10:22
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 thestormcong 的主題更新
| 3 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 求材料，環(huán)境專業(yè)調(diào)劑 +3 | 18567500178 2026-03-18 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 0703化學(xué)求調(diào)劑 +4 | 奶油草莓. 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 306求調(diào)劑 +9 | chuanzhu川燭 2026-03-18 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 工科材料085601 279求調(diào)劑 +8 | 困于星晨 2026-03-17 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 263求調(diào)劑 +6 | yqdszhdap－ 2026-03-22 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 276求調(diào)劑 +3 | YNRYG 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 323求調(diào)劑 +6 | 洼小桶 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +7 | Auroracx 2026-03-22 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 廣西大學(xué)材料導(dǎo)師推薦 +3 | 夏夏夏小正 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料工程專碩 348分求調(diào)劑 +3 | 冬辭. 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求助 +5 | 夢里的無言 2026-03-21 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +3 | 余意卿 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +10 | yy要上岸呀 2026-03-17 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +4 | ydfyh 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 295求調(diào)劑 +4 | 一志愿京區(qū)211 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿 西北大學(xué) ，070300化學(xué)學(xué)碩，總分287，雙非一本，求調(diào)劑。 +4 | 晨昏線與星海 2026-03-19 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿西南交通 專碩 材料355 本科雙非 求調(diào)劑 +5 | 西南交通專材355 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考研]
 320求調(diào)劑0856
+3
|
不想起名字112 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 +4 | 18889395102 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 本科鄭州大學(xué)物理學(xué)院，一志愿華科070200學(xué)碩，346求調(diào)劑 +4 | 我不是一根蔥 2026-03-18 | 4/200 |
|