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xiaomuxiaoma鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
pcr污染怎么辦？
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這樣pcr出來的結(jié)果是試劑污染了嗎？應(yīng)該怎樣排查是哪種試劑污染了�。� 原來的pcr體系受到了污染，不加模板也能擴(kuò)出來，先設(shè)計(jì)一實(shí)驗(yàn)，想確定是那種成分受到了污染。 2-6號(hào)為分別使用原來的buffer，Mg2+，dNTP，primer1,primer2中的一種，其他的四種成分都用新的，酶都還是用原來的，體系中不加模板，擴(kuò)出的結(jié)果 7號(hào)為加了模板，擴(kuò)出來正常， 8號(hào)為用購買的pcr mix（buffer，mg2+,dNTP，Taq預(yù)混好）加primer1，primer2，不加模板擴(kuò)出來的。 目標(biāo)片段283bp marker條帶分別為1200,900，750,600,450,300,150 H2O也是另換的一瓶水。 各位幫忙分析一下，這可能是什么被污染了？ |
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2樓2012-04-13 15:33:42
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【答案】應(yīng)助回帖
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xiaomuxiaoma: 金幣+1, ★有幫助 2012-04-17 10:50:07
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我實(shí)驗(yàn)室也遇到這種情況，也像你一樣把BUffer，酶，水都換了發(fā)現(xiàn)沒解決，最后發(fā)現(xiàn)是槍的問題，建議你去其他實(shí)驗(yàn)室(不做你那基因的),用人家的所有東西，別用自己的，估計(jì)就OK了。移液槍吸液時(shí)注意不要讓液體誤吸到槍體里，能清理的話隔一段時(shí)間用酒精洗一下。實(shí)驗(yàn)室做長(zhǎng)了這種實(shí)驗(yàn)也會(huì)形成氣溶膠，說不定就會(huì)跑到你的PCR體系里，建議這種易污染的實(shí)驗(yàn)在無菌操作臺(tái)里操作。 希望能幫到你，祝實(shí)驗(yàn)順利！ |
4樓2012-04-13 17:06:53
polo_lai
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5樓2017-11-21 12:02:04
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