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liu58yeying金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于酶的問(wèn)題，有一些常識(shí)問(wèn)題，但隔行如隔山啊！
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我從一個(gè)植物中提取出兩個(gè)三萜類化合物，一個(gè)三萜環(huán)上有一個(gè)葡萄糖，量還比較多，另一個(gè)正好是它的苷元，但量很少。我想做一個(gè)酶解反應(yīng)，把葡萄糖從三萜苷上水解下來(lái)，就在sigma公司買了杏仁來(lái)源的葡萄糖苷酶，但沒(méi)有成功。 想問(wèn)一下，同樣是beta-葡萄糖苷酶，來(lái)源不用，比如從杏仁或是大腸桿菌，有什么區(qū)別啊，我是不是要買不同來(lái)源的葡萄糖苷酶，然后篩選啊，總會(huì)有一種來(lái)源的酶可以水解我的化合物吧！ 如果一直找不到合適的酶，我能不能試圖從我提取的植物那里提取出它專有的葡萄糖苷酶啊，不過(guò)我完全沒(méi)有提取酶的基礎(chǔ)。。 |
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sanmiancxh
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
liu58yeying: 金幣+20, ★★★很有幫助, 謝謝 2012-04-17 09:15:46
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
liu58yeying: 金幣+20, ★★★很有幫助, 謝謝 2012-04-17 09:15:46
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首先，你確定是那個(gè)酶對(duì)你的底物不起作用？而不是反應(yīng)條件不合適或是檢測(cè)產(chǎn)物的手段有問(wèn)題？這個(gè)必須弄清楚，要不找多少酶都沒(méi)用 白花冤枉錢 另外，酶是有專一性的 與底物的結(jié)合位點(diǎn)不同 而且有外切的 內(nèi)切的 同樣是糖甘酶 也許對(duì)別的大直鏈的大分子切得挺嗨 就是對(duì)你的底物不來(lái)電呢 你要買的話最好能找到那些和你的植物來(lái)源相似的 或是底物結(jié)構(gòu)較為近似的 這樣成功的幾率高些 實(shí)在不行的話，提酶也不是不可以 你可以試試先從植物組織中弄些提取液，注意提取過(guò)程中別讓酶失活了，可以多試幾種手段 確定有活性 能弄出你想要的酶，再想辦法分離純化 |
3樓2012-04-17 00:24:25
2樓2012-04-16 19:05:53
zx6291
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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(1) 查一下文獻(xiàn)，是否已有報(bào)道哪種酶水解你的底物三萜苷或其結(jié)構(gòu)類似物，確認(rèn)酶的類型和來(lái)源； （2）如果沒(méi)有的話，可以買幾種不同來(lái)源的糖苷酶，然后做一下篩選啊。 （3）植物組織提取破碎液，看看是否有反應(yīng)發(fā)生，如果活力低的話，做一下蛋白濃縮。 |
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liu58yeying4樓2012-04-17 09:18:12
liu58yeying
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5樓2012-04-17 13:11:04
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