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jingqima2010木蟲 (小有名氣)
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[求助]
生物轉(zhuǎn)化 黃酮 相關(guān)問題 有經(jīng)驗(yàn)的朋友請(qǐng)幫個(gè)忙
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想做黃酮類化合物的腸內(nèi)菌生物轉(zhuǎn)化,現(xiàn)在遇到兩個(gè)比較大的問題,想請(qǐng)大家?guī)蛶兔Γ?br />
1、底物溶解度低,水中幾乎不容,加甲醇 dmso 效果都不好2、不轉(zhuǎn)化 第一個(gè)問題,我通過調(diào)節(jié)ph勉強(qiáng)算是解決了,但是底物還是不轉(zhuǎn)化。 我把我的操作從頭到尾說一下吧,請(qǐng)大家指點(diǎn)一下。 培養(yǎng)基配好后ph調(diào)節(jié)至7.2,滅菌后接入腸內(nèi)菌菌種,37℃培養(yǎng)24h后用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)ph至7.2,因?yàn)槟c內(nèi)菌產(chǎn)酸很多,所以加入底物前我又調(diào)節(jié)了ph,稱量底物加入水中,并加入適量氫氧化鈉,使底物完全溶解。以上操作均在厭氧箱內(nèi)完成。將溶解后的底物加入培養(yǎng)液封口搖床震蕩轉(zhuǎn)化24h。結(jié)束后用乙酸乙酯萃取,hplc檢測(cè),但是沒有發(fā)現(xiàn)新增加的峰。 希望大家指點(diǎn)!多謝多謝。! |
新蟲 (初入文壇)
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