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rosetina新蟲 (初入文壇)
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[求助]
急求！！96孔板棋盤微量稀釋法具體方法？？？ 已有1人參與
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我要做聯(lián)合藥敏試驗(yàn)。我想用96孔微量棋盤稀釋法測(cè)兩種抗菌物的MIC和FIC值，，急求溶解抗菌藥溶劑，丁二酸用什么溶解呢？96孔板又用什么規(guī)格的呢？96孔板怎么滅菌呢？能不能跟我說下具體步驟，不勝感激�。�！ 受試菌分別有腸炎沙門氏菌 金黃色葡萄球菌 大腸桿菌 受試菌是大腸桿菌 腸炎沙門氏菌 金黃色葡萄球菌三種，但我不清楚這三種菌最后用酶標(biāo)儀測(cè)分別選取多達(dá)波長(zhǎng)來(lái)測(cè)！抗菌藥梯度稀釋的范圍又改選多大尼？ 聯(lián)合最小抑菌濃度是它們聯(lián)合用藥后與空白對(duì)照吸光度一樣的那些結(jié)果中的它們各自最小抑菌濃度， 能不能舉例一次96孔棋盤的結(jié)果列表說明一下，我很困惑，萬(wàn)一出現(xiàn)A藥濃度是2，B藥濃度是3；A藥濃度是3，B藥濃度是2，這兩種，我該選取哪個(gè)為最小抑菌濃度呢？ [ Last edited by rosetina on 2012-4-23 at 00:05 ] |
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2樓2012-04-23 09:46:55
rosetina
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
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- 專業(yè): 微生物藥物
3樓2012-04-23 09:54:43
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4樓2012-04-23 23:27:58
liudaochuang
金蟲 (小有名氣)
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5樓2012-09-05 16:13:52
【答案】應(yīng)助回帖
| 先培養(yǎng)到一定濃度然后在單孔體積為360μL 的 96 孔細(xì)胞培養(yǎng)板內(nèi)采用逐級(jí)稀釋法測(cè)定MIC，共選取 8 個(gè)濃度梯度：a%、b%、c%、d%、e%、f%、g%、h%、i%、g%、0。在無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，（根據(jù)96孔板的結(jié)構(gòu)，12*8孔，注意每組設(shè)置6個(gè)平行，1行2個(gè)梯度，一共用5.5行，一共10個(gè)梯度，一組對(duì)照）在1-55孔中加入100μL 菌液，在第一梯度孔中加入100μL儲(chǔ)備液，混合均勻后取出100 μL加入第二梯度孔中，再混合均勻后取出100 μL加入第三梯度孔中，依次類推，到第10梯度孔時(shí)混合均勻后取出100 μL棄去，后面5孔為對(duì)照組，剩下的孔可以添加100μL無(wú)菌水或者培養(yǎng)基。37℃振蕩培養(yǎng)24 h，酶標(biāo)儀記錄濁度變化。能抑制溶液濁度變化的最低濃度就是最小抑菌濃度。 |
6樓2014-05-19 17:15:27
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本帖內(nèi)容被屏蔽 |
7樓2023-04-11 20:45:55
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