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急求��！96孔板棋盤微量稀釋法具體方法？？？ 已有1人參與
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我要做聯(lián)合藥敏試驗。我想用96孔微量棋盤稀釋法測兩種抗菌物的MIC和FIC值，，急求溶解抗菌藥溶劑，丁二酸用什么溶解呢？96孔板又用什么規(guī)格的呢？96孔板怎么滅菌呢？能不能跟我說下具體步驟，不勝感激�。�！ 受試菌分別有腸炎沙門氏菌 金黃色葡萄球菌 大腸桿菌 受試菌是大腸桿菌 腸炎沙門氏菌 金黃色葡萄球菌三種，但我不清楚這三種菌最后用酶標儀測分別選取多達波長來測！抗菌藥梯度稀釋的范圍又改選多大尼？ 聯(lián)合最小抑菌濃度是它們聯(lián)合用藥后與空白對照吸光度一樣的那些結果中的它們各自最小抑菌濃度， 能不能舉例一次96孔棋盤的結果列表說明一下，我很困惑，萬一出現(xiàn)A藥濃度是2，B藥濃度是3；A藥濃度是3，B藥濃度是2，這兩種，我該選取哪個為最小抑菌濃度呢？ [ Last edited by rosetina on 2012-4-23 at 00:05 ] |
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2樓2012-04-23 09:46:55
3樓2012-04-23 09:54:43
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4樓2012-04-23 23:27:58
liudaochuang
金蟲 (小有名氣)
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5樓2012-09-05 16:13:52
【答案】應助回帖
| 先培養(yǎng)到一定濃度然后在單孔體積為360μL 的 96 孔細胞培養(yǎng)板內(nèi)采用逐級稀釋法測定MIC，共選取 8 個濃度梯度：a%、b%、c%、d%、e%、f%、g%、h%、i%、g%、0。在無菌操作臺內(nèi)進行實驗，（根據(jù)96孔板的結構，12*8孔，注意每組設置6個平行，1行2個梯度，一共用5.5行，一共10個梯度，一組對照）在1-55孔中加入100μL 菌液，在第一梯度孔中加入100μL儲備液，混合均勻后取出100 μL加入第二梯度孔中，再混合均勻后取出100 μL加入第三梯度孔中，依次類推，到第10梯度孔時混合均勻后取出100 μL棄去，后面5孔為對照組，剩下的孔可以添加100μL無菌水或者培養(yǎng)基。37℃振蕩培養(yǎng)24 h，酶標儀記錄濁度變化。能抑制溶液濁度變化的最低濃度就是最小抑菌濃度。 |
6樓2014-05-19 17:15:27
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本帖內(nèi)容被屏蔽 |
7樓2023-04-11 20:45:55
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