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xzx018鐵桿木蟲 (著名寫手)
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當(dāng)?shù)玫揭粭l基因不能做表達(dá)的時候應(yīng)該做些什么 已有6人參與
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| 現(xiàn)在手頭在做的一個基因,但是不能做表達(dá),得到這個基因還可以從哪些地方入手啊,請高手指點(diǎn) |
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鐵桿木蟲 (著名寫手)
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木蟲 (正式寫手)

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難表達(dá)的基因的另一個研究方法,研究它與蛋白質(zhì)的相互作用,也就是研究DNA-Protein interaction。蛋白質(zhì)-DNA的相互作用研究方法:EMSA,足跡法,干擾法,CHIP,DNA-蛋白質(zhì)共結(jié)晶后X-ray diffraction,NMR,pull-down,光共振能量轉(zhuǎn)移,電子晶體學(xué),電子顯微鏡直接觀測,全內(nèi)反射熒光顯微術(shù)(TIRFM),原子力顯微鏡觀測,化學(xué)或酶試劑對于蛋白質(zhì)進(jìn)行裂解確定蛋白質(zhì)-DNA的相互作用位點(diǎn)確定,突變(定點(diǎn)突變,結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)換等)與蛋白質(zhì)再/去折疊對蛋白質(zhì)-DNA的相互作用位點(diǎn),低溫冷凍電鏡觀測,蛋白質(zhì)-DNA的相互作用的特異作用位點(diǎn)的化學(xué)交聯(lián)等。 反正DNA片段要起作用,肯定要通過反式因子,不然它就只能影響本條染色體,巨大多數(shù)反式因子是蛋白質(zhì),我們不好表達(dá)一段基因,就分析它與什么樣的蛋白質(zhì)發(fā)生相互作用,來打開研究其功能的途徑,參與基因表達(dá)調(diào)控本身也是一種重要的功能。還可以比較其結(jié)合的反式因子有什么具體特征,這本身就可挖掘到很多成果。進(jìn)一步對比結(jié)合類似的反式因子的基因片段都有哪些類型,多數(shù)出現(xiàn)在那里,結(jié)合不同的反式因子對應(yīng)細(xì)胞周期的時空關(guān)系。。?梢酝诰虺龊懿簧俚某晒皇菃? 我記得去以前看本軍事學(xué)書籍(一位俄羅斯坦克兵校官寫的,我雖然是女生,但是對于軍事學(xué)有些興趣),里面有段話我至今覺得挺有道理:他批駁了關(guān)于坦克無用論的觀點(diǎn),理由:現(xiàn)代坦克的日子可不好過了,反坦克武器(反坦克導(dǎo)彈、加農(nóng)炮、殲擊轟炸機(jī)、武裝直升機(jī)等)對于坦克殺傷力非常大,海灣戰(zhàn)爭和伊拉克戰(zhàn)爭都是明證,這是事實(shí),但是坦克是進(jìn)攻性武器,它可以選擇攻擊點(diǎn),如果把多數(shù)反坦克武器集中于一處,那么坦克會簡單地繞道而行,從其他地方進(jìn)攻。許多時候,正面攻克困難不容易,不如避開它繞道而行。 |
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