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[求助]
RNA干涉
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| 請(qǐng)教一下大家，我最近做RNA干涉，dsRNA的濃度分別用了50，100，150ng/ul，ddH2O溶解，以ddH2O處理和未做任何處理的樣品為對(duì)照。處理3天后做熒光定量發(fā)現(xiàn)，3種濃度的處理都比對(duì)照上調(diào)了好多倍，不知道是什么原因，請(qǐng)教一下！（模板測(cè)序過(guò)，是正確的） |
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3樓2012-04-30 22:51:03
heath666
金蟲(chóng) (初入文壇)
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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1，確定RNAi是否有效。因?yàn)椴皇撬性O(shè)計(jì)的dsRNA都會(huì)有效果，而且你只選擇一個(gè)72h時(shí)間點(diǎn)是不夠的，建議多設(shè)計(jì)幾對(duì)dsRNA，并且多加幾個(gè)時(shí)間點(diǎn)。 2，原則上RNA水平也不能完全代替蛋白水平，可以再用WB等檢測(cè)下蛋白水平。 3，即使以上條件都滿足，有的時(shí)候也確實(shí)存在這個(gè)問(wèn)題，原因還不確定，可能與脫靶效應(yīng)或者不同基因的相互作用有關(guān)。 希望能有幫助！ |
2樓2012-04-30 13:02:29
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
4樓2012-04-30 23:00:33
xujian568
至尊木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
Count XU
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5樓2012-05-01 15:11:30
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