 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 3322 | 回復(fù): 22 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
jamy1989木蟲 (小有名氣)
|
[求助]
透析 蛋白沉淀 復(fù)性
|
|
|
我的目的蛋白在用8M尿素溶解后透析復(fù)性，透析完后全部沉淀了，跑膠什么都沒有！我透析的步驟是： 1、4M尿素 0.1M Tris-Hcl 0.4M L-Arg 1mM EDTA 0.2mM PMSF 5%甘油 PH=8 2、1M尿素 0.1M Tris-Hcl 0.4M L-Arg 1mM EDTA 0.2mM PMSF 5%甘油 PH=8 3、binding buffer 20mM磷酸鈉 500mM氯化鈉 5mM咪唑 PH=7.6 蟲友分析可能是透析蛋白濃度大，梯度變化太大了！于是我重新做了兩個(gè)對(duì)比試驗(yàn)。這次透析的蛋白溶度被我降低了！并且每升只透析20ml，我做了個(gè)對(duì)比試驗(yàn)： 1號(hào)瓶分別用4M 尿素、 1M尿素、binding buffer 透析！ 2號(hào)瓶分別用4M 尿素、 2M尿素、1M尿素、0M尿素、binding buffer 透析！ 結(jié)果1號(hào)瓶還是在用binding buffer透析是全部出現(xiàn)沉淀，取沉淀跑膠，能看到目的條帶！ 2號(hào)瓶也是在用binding buffer 透析是全部出現(xiàn)沉淀（大約在透析3個(gè)小時(shí)的時(shí)候就有很多沉淀了），和1號(hào)瓶一樣！另外當(dāng)2號(hào)瓶透析到0M結(jié)束時(shí)我取了一些樣保留下來，跑膠能看到目的條帶！ 我在想是不是binding buffer 有問題呢？我底下準(zhǔn)備用His-tag純化蛋白，是不是一定要用binding buffer 透析呢？ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
271求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
求調(diào)劑323材料與化工
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
材料學(xué)碩，求調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
085600材料與化工調(diào)劑
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
各位老師您好：本人初試372分
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
【2026考研調(diào)劑】制藥工程 284分 求相關(guān)專業(yè)調(diào)劑名額
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
289求調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
278求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
總分293求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
生物技術(shù)與工程
已經(jīng)有3人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 原核表達(dá)形成了包涵體怎么辦啊？
已經(jīng)有22人回復(fù)
- 求助：純化蛋白遇到包涵體了，尿素怎么用？
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 純酶不透析直接測(cè)酶活有影響嗎
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 鎳柱純化蛋白透析出現(xiàn)大量沉淀，請(qǐng)教
已經(jīng)有18人回復(fù)
- gst標(biāo)簽，蛋白純化
已經(jīng)有25人回復(fù)
- 【求助/交流】蛋白純化中透析的問題��！
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【分享】蛋白質(zhì)純化個(gè)人總結(jié)2
已經(jīng)有38人回復(fù)
jamy1989
木蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 6557.3
- 散金: 1316
- 帖子: 155
- 在線: 91.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 1655635
- 注冊(cè): 2012-03-01
- 專業(yè): 病原細(xì)菌與放線菌生物學(xué)
4樓2012-05-08 21:03:05
danbomingyue
禁蟲 (正式寫手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
zhaohq1209: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流~ 2012-05-09 09:18:29
jamy1989: 金幣+5 2012-05-10 10:52:37
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
zhaohq1209: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流~ 2012-05-09 09:18:29
jamy1989: 金幣+5 2012-05-10 10:52:37
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
3樓2012-05-08 10:44:26
danbomingyue
禁蟲 (正式寫手)
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
5樓2012-05-09 12:14:28
dshlove
木蟲 (正式寫手)
- BioEPI: 9
- 應(yīng)助: 237 (大學(xué)生)
- 金幣: 4764.7
- 散金: 20
- 紅花: 10
- 帖子: 852
- 在線: 419.2小時(shí)
- 蟲號(hào): 1609389
- 注冊(cè): 2012-02-10
- 性別: GG
- 專業(yè): 污染控制化學(xué)
6樓2012-05-09 12:50:28
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 292求調(diào)劑 +4 | 鵝鵝鵝額額額額?/a> 2026-03-25 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 求調(diào)劑，一志愿:南京航空航天大學(xué)大學(xué) ，080500材料科學(xué)與工程學(xué)碩，總分289分 +6 | @taotao 2026-03-19 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +3 | 冬十三 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 收08調(diào)劑生 +6 | komorebi69 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料專碩找調(diào)劑 +5 | 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +5 | 顧九笙要謙虛 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研]
 0854 考研調(diào)劑 招生了！AI 方向
+5
|
pk3725069 2026-03-19 | 17/850 |
|
|
|
[考研] 306求0703調(diào)劑一志愿華中師范 +10 | 紙魚ly 2026-03-21 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 277分求調(diào)劑，跨調(diào)材料 +3 | 考研調(diào)劑lxh 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料/農(nóng)業(yè)專業(yè)，07/08開頭均可，過線就行 +3 | 呵唔哦豁 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 336求調(diào)劑 +4 | 收到VS 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 工科0856求調(diào)劑 +5 | 沐析汀汀 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[論文投稿] 急發(fā)核心期刊論文 +3 | 賢達(dá)問津 2026-03-23 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 291 求調(diào)劑 +4 | 化工2026屆畢業(yè)?/a> 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 324求調(diào)劑 +6 | lucky呀呀呀鴨 2026-03-20 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿深大，0703化學(xué)，總分302，求調(diào)劑 +4 | 七月-七七 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | 白QF 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿 西北大學(xué) ，070300化學(xué)學(xué)碩，總分287，雙非一本，求調(diào)劑。 +4 | 晨昏線與星海 2026-03-19 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿蘇州大學(xué)材料求調(diào)劑，總分315（英一） +5 | sbdksD 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +7 | ^O^乜 2026-03-19 | 7/350 |
|