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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 關于質粒的PCR
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[求助]
關于質粒的PCR
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| Taq酶是有5'->3'外切活性的，這樣的話Taq酶沿著質粒復制一圈回到起點后就會一邊外切一邊復制，造成缺口的移動，這樣的話后面的復制就會混亂，得不到目的片段。我是新手，不太明白，還望大俠指教！ |
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cheng_xiao
木蟲 (小有名氣)
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2樓2012-05-01 16:50:23
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vir2008
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【答案】應助回帖
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小丹木木: 金幣+3, 應助指數(shù)+1, 恩，很清楚了哦 2012-05-03 13:34:11
ValYu: 金幣+2, ★★★★★最佳答案, 原來是控制時間啊。還畫圖，太認真了！ 2012-05-03 21:38:50
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ValYu: 金幣+2, ★★★★★最佳答案, 原來是控制時間啊。還畫圖，太認真了！ 2012-05-03 21:38:50
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哦，我明白你的意思了。 不過一般來說，質粒比較大，PCR的延伸時間不足以給聚合酶環(huán)形復制的時間，所以第一次循環(huán)的產(chǎn)物應該是中間待擴增部分互補，兩端有冗余單鏈的雜交分子；從第二次循環(huán)開始，PCR產(chǎn)物就歸于正常了。 我畫了一個圖，不知能否解釋清楚： （黑色部分為待擴增片段，紅色部分為兩側冗余片段）。 |
6樓2012-05-02 22:36:05
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