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HPLC與RT-HPLC有什么區(qū)別
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| HPLC與RT-HPLC在原理上和應(yīng)用上有什么區(qū)別? |
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鐵蟲(chóng) (小有名氣)
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HPLC指液相色譜,RT-HPLC是反相高效液相色譜。RT-HPLC屬于HPLC HPLC高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。高效液相色譜是色譜法的一個(gè)重要分支,以液體為流動(dòng)相,采用高壓輸液系統(tǒng),將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內(nèi)各成分被分離后,進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè),從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。該方法已成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)。 RT-HPLC 由非極性固定相和極性流動(dòng)相所組成的液相色譜體系。它正好與由極性固定相和弱極性流動(dòng)相所組成的液相色譜體系(正相色譜)相反。RP-HPLC的典型的固定相是十八烷基鍵合硅膠,典型的流動(dòng)相是甲醇和乙腈。RP-HPLC是當(dāng)今液相色譜的最主要的分離模式,幾乎可用于所有能溶于極性或弱極性溶劑中的有機(jī)物的分離。 反相色譜法適于分離非極性,極性或離子型化合物,大部分的分析任務(wù)皆由反相色譜法完成。 此外,還有正相色譜,即采用極性固定相(如聚乙二醇、氨基與腈基鍵合相);流動(dòng)相為相對(duì)非極性的疏水性溶劑(烷烴類如正已烷、環(huán)已烷),常加入乙醇、異丙醇、四氫呋喃、三氯甲烷等以調(diào)節(jié)組分的保留時(shí)間。常用于分離中等極性和極性較強(qiáng)的化合物(如酚類、胺類、羰基類及氨基酸類等)。 正相和反相色譜主要是通過(guò)固定相和流動(dòng)相的極性大小來(lái)區(qū)分的,反相高效液相比較常用。 |
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