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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 微生物 » 實驗/技術 » 關于HPLC的應用
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ningfan1989鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
關于HPLC的應用
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各位熟悉HPLC的蟲友，本人剛剛接觸高效液相，現在需要改變流動相條件等推遲目標峰的出峰時間，同時盡量將峰形分開，請給予相應指導，萬分感謝��！ 現在的流動相比例是甲醇：水=7:3 |
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danbomingyue
禁蟲 (正式寫手)
★ ★ ★
感謝參與，應助指數 +1
zhang8826857: 金幣+3, 歡迎常來微生物板塊交流哦^_^ 2012-05-04 14:45:46
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zhang8826857: 金幣+3, 歡迎常來微生物板塊交流哦^_^ 2012-05-04 14:45:46
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2樓2012-05-04 14:03:04
癡夷子皮
版主 (文壇精英)
老痞
- MicEPI: 1
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【答案】應助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應助指數 +1
scelab: 金幣+5, MicEPI+1, 謝謝熱心交流~ :) 2012-05-04 17:46:06
感謝參與，應助指數 +1
scelab: 金幣+5, MicEPI+1, 謝謝熱心交流~ :) 2012-05-04 17:46:06
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推遲目標峰的出峰時間 1、增加水的比例，試試吧甲醇：水=7:3調整為5:5； 2、降低流速，如果現在流速是1.0，建議試試0.8，再低不要低于0.5； 3、降低柱溫，推薦30℃，太低會拖尾； 4、調控流動相ph，ph對保留時間的影響因樣品酸堿性而異，若樣品中性，就算了。 改善峰型及分離度 1、柱溫，柱溫高，流動相粘度低，減少拖尾，建議柱溫最高設置40℃； 2、流動相pH，如果要調控pH，可以考慮引入緩沖液，流動相保持一定的離子強度，改善峰型減少拖尾，并因樣品雜質酸堿性不同而有效分離； 3、梯度，如果是使用二院泵體系，就算了，不能實現。如果可以走梯度，可以試試4:6~6:4 |
3樓2012-05-04 16:47:29
4樓2012-05-04 19:30:07
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