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lantian_2011銀蟲 (初入文壇)
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建立完善的耐藥金黃色葡萄球菌細(xì)菌生物膜模型方法；對中藥材大黃提取分離純化，同時對大黃中分離得到的部分化合物進(jìn)行對細(xì)菌及細(xì)菌生物膜作用的活性研究�？疾炀哂锌咕饔玫闹兴巻误w化合物大黃蒽醌類化合物對耐藥細(xì)菌生物膜的作用；篩選出對耐藥細(xì)菌生物膜具有較強(qiáng)抑制作用的中藥活性單體，并考察其與大黃蒽醌類單體化合物及Rb1聯(lián)合應(yīng)用對細(xì)菌生物膜的影響。 通過96孔板進(jìn)行微量培養(yǎng)，采用SEM和CLSM觀察耐藥細(xì)菌生物膜的形成及形態(tài)，建立耐藥金黃色葡萄球菌細(xì)菌生物膜模型；以耐藥金黃色葡萄球菌生物膜模型為藥物篩選模型；采用微量肉湯稀釋法篩選與大黃蒽醌單體及Rb1聯(lián)合用藥對細(xì)菌及生物膜產(chǎn)生有效作用的其他中藥單體；將大黃單體提取物、中藥單體化合物與細(xì)菌及細(xì)菌生物膜共同培養(yǎng)，通過酶標(biāo)儀測取OD值從而測定細(xì)菌及生物膜的生長能力，通過計算抑菌率和F值來觀察各樣品單獨(dú)及聯(lián)合用藥對細(xì)菌及生物膜抑制作用的大小。 通過酶標(biāo)儀測定OD值及掃描電子顯微鏡（SEM）和激光共聚焦電子顯微鏡（CLSM）的鏡下觀察的結(jié)果，確定耐藥菌金黃色葡萄球菌在37℃培養(yǎng)24h時，形成生物膜；大黃蒽醌單體對正常金黃色葡萄球菌的抑制率最高達(dá)78.17%，大黃蒽醌單體對耐藥金黃色葡萄球菌的抑制率最高達(dá)62.62%；篩選出單體瑞香素、焦沒食子酸、硫酸氫小檗堿對金黃色葡萄球菌及BBF具有很強(qiáng)的抑制作用，焦沒食子酸對耐藥金黃色葡萄球菌的抑制率最高達(dá)71.78%，硫酸氫小檗堿對耐藥金黃色葡萄球菌的抑制率最高達(dá)72.14%，瑞香素對耐藥金黃色葡萄球菌的抑制率最高達(dá)73.22%；聯(lián)合用藥結(jié)果顯示：瑞香素、焦沒食子酸、硫酸氫小檗堿與大黃酸聯(lián)合應(yīng)用，對正常和耐藥金黃色葡萄球菌及BBF產(chǎn)生一定協(xié)同抑制作用；人參皂苷Rb1與瑞香素聯(lián)合應(yīng)用，對正常大腸桿菌及BBF產(chǎn)生一定協(xié)同抑制作用。 結(jié)論：通過掃描電子顯微鏡（SEM）和激光共聚焦電子顯微鏡（CLSM）實驗，建立了耐藥細(xì)菌生物膜模型；通過中藥單體化合物對BBF的作用，進(jìn)一步驗證了微量法作為篩選治療慢性感染性疾病藥物模型的可行性。篩選出對細(xì)菌及BBF具有較強(qiáng)抑制作用的大黃蒽醌單體，并與瑞香素、焦沒食子酸、硫酸氫小檗堿聯(lián)合應(yīng)用對正常和耐藥金黃色葡萄球菌及BBF產(chǎn)生一定的協(xié)同抑制作用，這為尋找聯(lián)合用藥代替抗生素藥物，治療慢性感染性疾病的深入開發(fā)研究，提供科學(xué)的依據(jù)，為后續(xù)研究打下良好的基礎(chǔ)。 |
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