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IllusionLase新蟲 (小有名氣)
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[求助]
【求助】關(guān)于HPLC測定多糖組成的幾個疑問
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1.我打算用PMP做柱前衍生化然后進樣,但是許多文獻都用的是柱長250mm的C18反相柱。我手頭只有安捷倫的Eclipse C8反相柱,柱長150mm內(nèi)徑4mm。請問使用以上兩種色譜柱的色譜結(jié)果有什么區(qū)別? 2.今天用葡萄糖(分析純)配了0.1mmol/L的標準品溶液,做完衍生化后稀釋500倍做UV-Vis掃描,掃描波長190-700nm,發(fā)現(xiàn)除了目標峰之外還有個最大吸收波長為197.9nm的強峰。懷疑是所用蒸餾水中雜質(zhì),可對蒸餾水掃描同樣的波長范圍卻沒有這個峰的存在。后來抱著懷疑的心態(tài)用之前剩余的標準品葡萄糖溶液稀釋500倍后做波長掃描,發(fā)現(xiàn)有個最大吸收波長為204.7nm的吸收峰(吸光度2.584A)。調(diào)零用的是同樣的蒸餾水?善咸烟侨芤翰粦(yīng)該是幾乎沒有紫外吸收的么? |
鐵桿木蟲 (著名寫手)

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