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IllusionLase新蟲 (小有名氣)
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[求助]
【求助】關(guān)于HPLC測(cè)定多糖組成的幾個(gè)疑問
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1.我打算用PMP做柱前衍生化然后進(jìn)樣,但是許多文獻(xiàn)都用的是柱長(zhǎng)250mm的C18反相柱。我手頭只有安捷倫的Eclipse C8反相柱,柱長(zhǎng)150mm內(nèi)徑4mm。請(qǐng)問使用以上兩種色譜柱的色譜結(jié)果有什么區(qū)別? 2.今天用葡萄糖(分析純)配了0.1mmol/L的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,做完衍生化后稀釋500倍做UV-Vis掃描,掃描波長(zhǎng)190-700nm,發(fā)現(xiàn)除了目標(biāo)峰之外還有個(gè)最大吸收波長(zhǎng)為197.9nm的強(qiáng)峰。懷疑是所用蒸餾水中雜質(zhì),可對(duì)蒸餾水掃描同樣的波長(zhǎng)范圍卻沒有這個(gè)峰的存在。后來抱著懷疑的心態(tài)用之前剩余的標(biāo)準(zhǔn)品葡萄糖溶液稀釋500倍后做波長(zhǎng)掃描,發(fā)現(xiàn)有個(gè)最大吸收波長(zhǎng)為204.7nm的吸收峰(吸光度2.584A)。調(diào)零用的是同樣的蒸餾水。可葡萄糖溶液不應(yīng)該是幾乎沒有紫外吸收的么? |
鐵桿木蟲 (著名寫手)

新蟲 (小有名氣)
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