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shui__lian新蟲 (初入文壇)
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[求助]
黃精多糖含量出奇高 怎么回事
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大家好 我現(xiàn)在用藥典方法 提取多糖 測黃精中多糖含量 即取60度干燥恒重的生黃精粉末0.25g，精密稱定，置圓底燒瓶中，加80%乙醇150ml回流提取1h，趁熱濾過，殘?jiān)?0%乙醇洗滌3次，每次10ml，將殘?jiān)盀V紙置燒瓶中，加水150ml，加熱回流1h，趁熱濾過，殘?jiān)盁坑盟礈?次，每次10ml，合并濾液與洗液，放冷，轉(zhuǎn)移至250ml容量瓶中，加水至刻度，搖勻 精密吸取1ml至10ml具塞干燥試管中，加水至2ml，搖勻，在冰水浴中緩慢滴加0.2%蒽酮-硫酸溶液，至刻度，混勻，放冷后至水浴用保溫10min，取出，立即置冰水浴中冷卻10min，取出，以相應(yīng)試劑為空白，照紫外可見分光光度計(jì)在582nm波長處測定吸光度。 我分別按上述方法提了6次樣品，測得多糖含量 68% 左右。 實(shí)在搞不懂到底哪里出了問題，使測出的多糖含量這么高。。。 在做含量測定時(shí)，分別吸取1ml多糖液、1ml水和8ml0.2%蒽酮硫酸溶液時(shí) 都是用吸量管吸取的 這樣重復(fù)性比較好 但是就是含量出奇的高 哪位高手指點(diǎn)一下 謝啦 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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1.葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 將l000µg/mL稀釋為l00µg/mL。 取7支大試管，按下表數(shù)據(jù)配制一系列不同濃度的葡萄糖溶液： 管號(hào) 1 2 3 4 5 6 7 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液（mL） 0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 蒸餾水（mL） 1 0.9 0.8 0.6 0.4 0.2 0 葡萄糖含量（µg） 0 10 20 40 60 80 100 在每支試管中立即加入蒽酮試劑5.0mL，（迅速浸于冰水浴中冷卻，）各管加完后一起浸于沸水浴中，管口加蓋，以防蒸發(fā)。自水浴沸騰起計(jì)時(shí)，準(zhǔn)確煮沸l(wèi)0 min，取出，用冰浴冷卻至室溫，在620 nm波長下以第一管為空白，迅速測其余各管吸光值。以標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖含量（µg/ml）為橫坐標(biāo)，以吸光值為縱坐標(biāo)，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。（EXCEL作圖） |
4樓2012-05-12 10:16:39
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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本帖內(nèi)容被屏蔽 |
3樓2012-05-08 23:22:01
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
shui__lian: 金幣+5, ★★★很有幫助, 謝謝龍貓2585 2012-05-14 16:53:55
shui__lian: 金幣+5, ★★★很有幫助, 謝謝龍貓2585 2012-05-14 16:53:55
| 這是蒽酮硫酸法的標(biāo)準(zhǔn)方法，與你的方法有一定差距，波長選定，最好是自己進(jìn)行全波長掃描確定最優(yōu)的；其次樣品0.25g太少了，如果原料不算很貴的話，可以適當(dāng)加大量；樣品測定時(shí)，吸光值應(yīng)該在你的標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi)，偏高偏低都不準(zhǔn)確；再者，不知黃精總糖含量是多少，有可能你得到的結(jié)果是總糖，標(biāo)準(zhǔn)方法不一定適合每個(gè)原料，建議將多糖醇沉一下，復(fù)溶再測定，進(jìn)行比較一下... |
5樓2012-05-12 10:28:21
6樓2012-05-16 18:03:51
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