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細胞增值毒性試驗IC50測定時藥物加入濃度的問題
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我現(xiàn)在正在測一種藥物的半數(shù)抑制濃度IC50, 我看好多文獻都說了,一般測IC50必須設(shè)置5個以上藥物濃度梯度,每個濃度設(shè)3個復(fù)孔。假如我的實驗設(shè)計中要求測定時藥物濃度梯度設(shè)定為2,4,6,8,10,12 mmol/L,那么我的疑問是這個藥物濃度應(yīng)該是藥物加入到細胞懸液之前的濃度還是加入到細胞懸液后的濃度。具體應(yīng)該是以下哪種方案正確? 方案一:每孔加入細胞懸液90μL,每孔加入10μL 濃度分別為20,40,60,80,100,120 mmol/L的藥物,這樣藥物的終濃度大約為2,4,6,8,10,12 mmol/L。 方案二:每孔加入細胞懸液100μL,每孔直接加入10μL 濃度分別為2,4,6,8,10,12 mmol/L的藥物。 簡單說,計算IC50時用的藥物濃度是把藥物加入細胞懸液之前的濃度還是加入之后的濃度? 備注疑點:好多文獻都說一般96孔板加入細胞懸液100μL,加藥是10μL,假如以方案一來為依據(jù)的話,藥物加入后的終濃度就不好算了。 |
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