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[交流]
怎樣準(zhǔn)確建立總黃酮的檢測(cè)方法？
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本人最近提取植物總黃酮，其主要成分含有蘆丁、槲皮素、異槲皮素、金絲桃苷、紫云英苷等多種黃酮類(lèi)化合物。經(jīng)查閱《國(guó)藥大典》，以蘆丁作標(biāo)樣建立標(biāo)準(zhǔn)曲線： 精密稱(chēng)取蘆丁25mg ，加甲醇定容至25 ml ，取10ml 并且用蒸餾水釋至100 ml 。分別準(zhǔn)確吸取0、1. 0、2. 0、3. 0、4. 0、5. 0、6.0 ml 于25 ml 容量瓶中用10%甲醇定容各容量瓶至6ml，加含5 % NaNO2 水溶液1ml ，搖勻靜置6 min ，再加含10 %Al (NO3) 3 水溶液1 ml ，搖勻靜置6 min，再加含1. 0mol/L NaOH水溶液10 ml ，用蒸餾水稀釋定容至刻度，搖勻靜置16 min，在480～540 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描，確定最大吸收波長(zhǎng)在508 nm處，得到蘆丁濃度( x) 與吸光度( y) 的關(guān)系的回歸方程。 但是最后經(jīng)過(guò)萃取和樹(shù)脂純化后，檢測(cè)結(jié)果120%以上，試過(guò)很多次，都是100%以上，請(qǐng)問(wèn)各位高人指點(diǎn)一二�。。。�！ |
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 天然產(chǎn)物 分離提取 分析 |
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xiaoxiao270: 金幣+1, 3Q 2012-05-26 19:11:45
604540357(金幣+1): 謝謝參與
xiaoxiao270: 金幣+1, 3Q 2012-05-26 19:11:45
|
對(duì)于您的問(wèn)題，個(gè)人認(rèn)為有可能是幾個(gè)方面的原因 1、實(shí)驗(yàn)儀器可能有問(wèn)題，建議檢查或者做空白看看。 2、對(duì)于您說(shuō)的純化后達(dá)到120%，不知道您是怎么算的，是否計(jì)算有誤？ 4、蘆丁表樣是否有問(wèn)題？ 5、一般如果相隔時(shí)間比較長(zhǎng)的話，您的標(biāo)準(zhǔn)曲線建議重新做。 6、顯色劑的選擇不對(duì)也有可能出現(xiàn)問(wèn)題。 建議各個(gè)排除后解決問(wèn)題。 |
23樓2012-05-13 19:27:11
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送鮮花一朵
xiaoxiao270: 金幣+1, 3q 2012-05-26 19:11:52
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送鮮花一朵xiaoxiao270: 金幣+1, 3q 2012-05-26 19:11:52
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24樓2012-05-13 23:07:42
sunjian于
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33樓2013-11-25 20:24:22
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
| 我可以弱弱的說(shuō)一句這個(gè)方法是不科學(xué)的嗎？標(biāo)曲是蘆丁，總黃酮里卻不只是蘆丁，難道槲皮素、異槲皮素、金絲桃苷、紫云英苷等多種黃酮類(lèi)化合物的最大吸收波長(zhǎng)都在508nm嗎？我覺(jué)得不合理。還有就是顯色時(shí)間，待測(cè)物質(zhì)的濃度（線性范圍）需要注意。待測(cè)溶液顏色不能太深，要接近標(biāo)曲時(shí)蘆丁溶液濃度，溶液要澄清透亮，否則結(jié)果會(huì)偏大。盡量用石英吧。我做過(guò)總黃酮和多糖（混合物）測(cè)定，重現(xiàn)性很不好。 |
34樓2013-11-26 21:44:00
35樓2013-11-26 21:45:16
wang95278729
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xachenxi3樓
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2012-05-10 18:03
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bestyqs11樓
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wlxwlx102612樓
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83996778117樓
2012-05-11 10:50
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