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wwmin新蟲 (初入文壇)
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[求助]
大片段DNA測序的問題 已有1人參與
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| 各位大仙，小弟最近在做線粒體DNA基因組，用了兩個引物分別擴增出一條7K和一條9K左右的片段，請問不用克隆可以直接測序嗎（克隆這么大的片段太難了，您懂的），如果可以的話，用什么方法，價格大約多少呢？先謝過了~Sample TextSample TextSample Text |
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susizheng
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2樓2012-05-13 20:49:57
wwmin
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3樓2012-05-13 23:14:44
susizheng
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【答案】應(yīng)助回帖
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yqbter: 金幣+2, 鼓勵新蟲發(fā)帖應(yīng)助 2012-05-27 00:33:46
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| 一個反應(yīng)25塊,7k+8K共15k，一個反應(yīng)按800算，總共差不多20個反應(yīng)，測序總結(jié)500塊，引物的話20個反應(yīng)20個條引物，除去擴增用的4條，還需16條引物，每條按均價25塊算，引物大約共需400塊，總計大概900塊，如果設(shè)計的好的話。但有一點要注意，因為你測得反應(yīng)多，所以對模板要求量也大，所以多擴點吧。其實如果只想驗證是不是的話，一個反應(yīng)就夠了。如果要用的話，還是連到終載體上再測通吧，你這樣測通沒什么意義感覺！ |
5樓2012-05-15 12:58:33
wwmin
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我只想知道這個序列，所以要測通的，就像您說的，要很多模版，對模版的質(zhì)量要求高，不過這個不是問題，連接到載體會不會有太大了？ 6樓2012-05-26 19:41:32
7樓2012-05-27 09:22:35
8樓2017-07-18 17:52:05
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