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wwmin新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
大片段DNA測(cè)序的問(wèn)題 已有1人參與
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| 各位大仙，小弟最近在做線粒體DNA基因組，用了兩個(gè)引物分別擴(kuò)增出一條7K和一條9K左右的片段，請(qǐng)問(wèn)不用克隆可以直接測(cè)序嗎（克隆這么大的片段太難了，您懂的），如果可以的話(huà)，用什么方法，價(jià)格大約多少呢？先謝過(guò)了~Sample TextSample TextSample Text |
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susizheng
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2樓2012-05-13 20:49:57
wwmin
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3樓2012-05-13 23:14:44
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4樓2012-05-14 08:35:09
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
yqbter: 金幣+2, 鼓勵(lì)新蟲(chóng)發(fā)帖應(yīng)助 2012-05-27 00:33:46
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
yqbter: 金幣+2, 鼓勵(lì)新蟲(chóng)發(fā)帖應(yīng)助 2012-05-27 00:33:46
| 一個(gè)反應(yīng)25塊,7k+8K共15k，一個(gè)反應(yīng)按800算，總共差不多20個(gè)反應(yīng)，測(cè)序總結(jié)500塊，引物的話(huà)20個(gè)反應(yīng)20個(gè)條引物，除去擴(kuò)增用的4條，還需16條引物，每條按均價(jià)25塊算，引物大約共需400塊，總計(jì)大概900塊，如果設(shè)計(jì)的好的話(huà)。但有一點(diǎn)要注意，因?yàn)槟銣y(cè)得反應(yīng)多，所以對(duì)模板要求量也大，所以多擴(kuò)點(diǎn)吧。其實(shí)如果只想驗(yàn)證是不是的話(huà)，一個(gè)反應(yīng)就夠了。如果要用的話(huà)，還是連到終載體上再測(cè)通吧，你這樣測(cè)通沒(méi)什么意義感覺(jué)！ |
5樓2012-05-15 12:58:33
wwmin
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我只想知道這個(gè)序列，所以要測(cè)通的，就像您說(shuō)的，要很多模版，對(duì)模版的質(zhì)量要求高，不過(guò)這個(gè)不是問(wèn)題，連接到載體會(huì)不會(huì)有太大了？ 6樓2012-05-26 19:41:32
7樓2012-05-27 09:22:35
半天云
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8樓2017-07-18 17:52:05
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