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manengxuan木蟲 (小有名氣)
木木
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[交流]
求助：高效液相色譜（熒光檢測器）為什么會出現(xiàn)倒峰？ 已有4人參與
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| 我剛開始做色譜，想向各位高手求助一下，為什么低濃度的樣品的色譜圖上會出現(xiàn)倒峰啊？ |
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manengxuan
2樓2012-05-16 09:52:05
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3樓2012-05-16 10:04:54
lijin79833
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4樓2012-05-16 10:08:59
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5樓2012-05-16 10:35:55
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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很多問題可以在谷歌上找到答案，這里有一個比較全面的解釋： 在色譜分析中，通常會遇到偽峰的情況，這種現(xiàn)象給正常色譜分析工作帶來了極大的干擾和影響。 為解決這個問題，首先必須弄清楚產(chǎn)生偽峰的原因。 最簡單的情形是所用的流動相在檢測波長下有吸收，而進在此波長下沒有吸收的溶劑，在流動相中會出現(xiàn)“洞穴”，通過色譜柱后出倒峰。 至于偽峰產(chǎn)生的原因，可作如下解釋： 通常樣品（X）和流動相（M）間可能存在兩種作用——協(xié)同的吸著作用和競爭的吸著作用。 假設(shè)樣品分子X不可檢測（無紫外吸收），流動相組分M可檢測。M常是流動相中的雜質(zhì)，而X可能是溶解樣品溶劑中的雜質(zhì)或組分，或者是真實的樣品組分。在協(xié)同吸著作用下，如果tM小于tX，流動相組分首先離開柱，則M以倒峰先離開柱，接著X出正峰；如果M和X的保留時間相反，即tM大于tX，則X先離開柱出倒峰，后流出的M出正峰。 在離子對色譜中是以協(xié)同吸著作用為模式。在反相或正相色譜中是競爭而不是協(xié)同，結(jié)果引起不同形式的偽峰：先出的偽峰是正峰，后出的偽峰是倒峰。 一旦出現(xiàn)了偽峰，可考慮用下面幾種思路予以糾正： （1）用純試劑作流動相。以高質(zhì)量的離子對試劑和緩沖物質(zhì)配制流動相，各類試劑加和起來應(yīng)產(chǎn)生最小的偽峰效應(yīng)。 （2）用流動相溶解樣品。以其它溶劑溶解樣品可能產(chǎn)生偽峰或?qū)е聜畏宓漠a(chǎn)生，用流動相溶解樣品可減少產(chǎn)生偽峰的幾率。 （3）進最小體積的樣品溶液。偽峰常與樣品體積成比例，離子對色譜的進樣體積要低于50ul。 （4）預(yù)處理好樣品。樣品中的雜質(zhì)會促成偽峰的出現(xiàn)。 若用上述方法還不能去掉偽峰，則可視作為特殊的干擾峰來處理，即作為特殊的組分。改變色譜條件，使偽峰位置發(fā)生變化，避開被干擾的峰 |
6樓2012-05-16 15:29:01
manengxuan
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7樓2012-05-16 20:30:59
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8樓2015-01-14 19:22:50
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9樓2015-10-23 16:09:50
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