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倦怠陰天

木蟲 (正式寫手)

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[求助] HPLC使用緩沖鹽后如何沖柱

流動(dòng)相：甲醇-0.1%磷酸（三乙胺調(diào)PH至6）=60:40
使用的是C18柱，由于液相接觸不是很多，聽說使用緩沖鹽對(duì)柱子影響比較大，想請(qǐng)教一下大家，如何沖柱才能盡量減少緩沖鹽對(duì)柱子的損壞

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1樓 2012-05-16 13:49:28

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ziyu070602

鐵桿木蟲 (知名作家)

兩娃娃的爹

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引用回帖:

5樓: Originally posted by 女巫的小木屋 at 2012-05-16 14:56:00:
我的方法：90%水-10%乙腈，沖1個(gè)小時(shí);
            70%水-30%乙腈，沖10分鐘；
         30%水-70%乙腈，沖10分鐘；
         10%水-90%乙腈，沖30分鐘
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你這樣沖，柱子都不好意思再壞了

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我本將心比明月，奈何明月照溝渠。

7樓2012-05-16 17:07:40

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wddmq

木蟲 (正式寫手)

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豆哥: 金幣+1, 謝謝參與交流 2012-05-16 14:52:17

先水相大比例沖，再換成有機(jī)相大比例沖，主要是防止緩沖鹽在柱子中析出。對(duì)柱子損傷較大的是離子對(duì)試劑。你這個(gè)流動(dòng)相三乙胺用量很小，基本上對(duì)柱子沒什么損害的。

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1234

2樓2012-05-16 13:56:44

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lijin79833

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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
leecius: 金幣+1, 謝謝應(yīng)助 2012-05-18 13:32:21

用甲醇：水60：40沖洗就可以，至少30倍柱體積。

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用心做好藥

3樓2012-05-16 14:15:37

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xxaijwd

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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
豆哥: 金幣+1, 謝謝參與交流 2012-05-16 14:52:31

磷酸鹽容易堵柱子和儀器。柱我們一般是用10%甲醇－水沖一小時(shí)后再用甲醇沖半小時(shí)。

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4樓2012-05-16 14:50:59

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女巫的小木屋

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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
豆哥: 金幣+1, 謝謝參與交流，但是用乙腈的話，成本就上去了啊~~~ 2012-05-16 15:49:56

我的方法：90%水-10%乙腈，沖1個(gè)小時(shí);
            70%水-30%乙腈，沖10分鐘；
         30%水-70%乙腈，沖10分鐘；
         10%水-90%乙腈，沖30分鐘
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5樓2012-05-16 14:56:00

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癡夷子皮

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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
leecius: 金幣+1, 謝謝應(yīng)助 2012-05-18 13:32:30

1、大比例水相（eg：80%水-20%乙腈或甲醇），0.5ml/min，50min
2、梯度10min至大比例有機(jī)相（eg：80%乙腈或甲醇-20%水）0.5ml/min，40min
3、根據(jù)色譜柱保存條件選擇，如95%或100%有機(jī)相保存，再過渡20min左右即可。

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守候在風(fēng)中的寧靜。

6樓2012-05-16 17:01:37

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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
leecius: 金幣+1, 謝謝應(yīng)助 2012-05-18 13:32:36

10%甲醇沖1.5h，再換純甲醇沖1h，就ok

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我像只魚兒自由自在地游

8樓2012-05-16 17:37:58

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倦怠陰天

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進(jìn)樣前柱子如何平衡？

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9樓2012-05-16 18:40:23

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兮兮巖

銅蟲 (初入文壇)

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leecius: 金幣+1, 謝謝參與！ 2012-05-18 13:32:42

先用較大比例的純水沖柱，時(shí)間稍微長一點(diǎn)，然后逐漸增大甲醇的比例即可，

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10樓2012-05-16 21:27:14

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