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lifei_dut金蟲 (小有名氣)
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[求助]
菌液PCR結(jié)果不正確
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| 采用一對引物擴(kuò)增序列重組后，用重組菌液進(jìn)行PCR，希望獲得相應(yīng)的DNA序列。采用跟對擴(kuò)引物相同的引物進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)，本來應(yīng)該是570bp的條帶只有200左右，不知道是什么原因？排除了藥品的質(zhì)量問題。 |
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凌波麗
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2樓2012-05-18 10:26:51
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
lifei_dut: 金幣+5, ★★★很有幫助 2012-09-20 16:18:12
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
lifei_dut: 金幣+5, ★★★很有幫助 2012-09-20 16:18:12
| 是不是你在挑單菌落的時(shí)候挑的太少了，我們實(shí)驗(yàn)室一般要挑20個(gè)左右，這樣才能保證在20個(gè)里有重組成功的。你菌液PCR出來只有200左右我覺得應(yīng)該是質(zhì)粒，你挑的菌落都是假陽性菌落，所以我建議以后挑菌落的時(shí)候多挑一些，雖然會(huì)麻煩一些，但是可以最大程度的保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果。還有我覺得感受態(tài)的質(zhì)量也會(huì)對實(shí)驗(yàn)記過產(chǎn)生一定影響。 |
5樓2012-05-19 09:12:56
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