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[交流] 納豆芽孢桿菌在搖瓶里不產(chǎn)生芽孢

最近一段時(shí)間在做納豆芽孢桿菌的研究，目的是產(chǎn)生大量的芽孢做為益生菌。首先摸索了一下是在5L的小罐里，用斜面接種，然后發(fā)酵，有的時(shí)候挺好，產(chǎn)大量的芽孢，有的時(shí)候也有不產(chǎn)芽孢或者是菌體成鏈狀，鏡檢和斜面有區(qū)別，估計(jì)是染菌，但又感覺不像，因?yàn)槭紫瓤障?個(gè)小時(shí)后又滅菌40min，應(yīng)該比較徹底。
現(xiàn)在想優(yōu)化一下培養(yǎng)基，因?yàn)閷?shí)驗(yàn)次數(shù)比較多，想先在搖瓶里優(yōu)化后再上罐驗(yàn)證。現(xiàn)在轉(zhuǎn)速280r/min，培養(yǎng)37℃，500ml三角瓶裝液量50ml-100ml，但是做了幾次都不產(chǎn)生芽孢。估計(jì)是搖瓶溶氧不如小罐，但是這樣也不應(yīng)該一個(gè)芽孢也沒有啊，鏡檢了幾十個(gè)片子，一個(gè)芽孢都沒有。不是染色技術(shù)的問題，因?yàn)橐呀?jīng)做過上千次芽孢染色了，很有經(jīng)驗(yàn)。
有沒有做同樣研究的，產(chǎn)芽孢的同仁大家討論交流一下。

[ Last edited by han_0532 on 2012-5-20 at 19:46 ]

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枯草芽孢

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1樓 2012-05-20 19:20:26

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加一點(diǎn)金屬離子試試，尤其是錳離子，應(yīng)該對(duì)產(chǎn)芽孢很有效

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9樓2012-12-24 21:37:34

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你好，我也是是做納豆芽孢桿菌發(fā)酵的，今年研一，但是由于剛開始做不太會(huì)，能否請(qǐng)教你關(guān)于納豆芽孢桿菌培養(yǎng)基以及活菌計(jì)數(shù)的問題

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11樓2014-06-27 15:40:45

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vizy

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han_0532: 金幣+1 2012-05-20 21:13:18

有可能養(yǎng)的時(shí)間不夠呢。沒做你說的那個(gè)，不過以前也做過芽孢染色之類的，要到一定的時(shí)間才會(huì)產(chǎn)生芽孢。專門取樣觀察過。

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2樓2012-05-20 21:09:44

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引用回帖:

2樓: Originally posted by vizy at 2012-05-20 21:09:44:
有可能養(yǎng)的時(shí)間不夠呢。沒做你說的那個(gè)，不過以前也做過芽孢染色之類的，要到一定的時(shí)間才會(huì)產(chǎn)生芽孢。專門取樣觀察過。

培養(yǎng)了72個(gè)小時(shí)也沒有長。用普通的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，應(yīng)該早耗盡了吧。在小罐上24個(gè)小時(shí)，比較好的時(shí)候就有80%左右的芽孢。

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3樓2012-05-20 21:14:58

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damaomao

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應(yīng)該試試固態(tài)發(fā)酵呀。

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5樓2012-05-21 12:35:25

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han_0532: 金幣+1 2012-05-22 18:33:00

芽孢是在逆境中產(chǎn)生的，只有條件不適宜菌體生長，才會(huì)產(chǎn)芽孢，發(fā)酵罐通氣較好，營養(yǎng)物質(zhì)消耗快，營養(yǎng)耗盡后會(huì)產(chǎn)芽孢會(huì)產(chǎn)芽孢。
另外有的菌體芽孢形成受群體效應(yīng)調(diào)控，菌體濃度達(dá)不到，信號(hào)分子積累不夠，就可能不產(chǎn)或少產(chǎn)芽孢。
個(gè)人經(jīng)驗(yàn)，經(jīng)供參考。

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6樓2012-05-21 12:48:23

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thiophene9859

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降低培養(yǎng)基中氮源或者碳源濃度，一般會(huì)使產(chǎn)芽孢時(shí)間提前，但同時(shí)菌體濃度也上不去。

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7樓2012-05-21 12:51:36

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javadig

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芽孢是在菌體生長條件惡化時(shí)才出現(xiàn)的。建議在對(duì)數(shù)期人為改變理化條件，例如大幅降低pH，呵呵。

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8樓2012-05-23 11:57:58

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haomayan

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樓主，你好！本人準(zhǔn)備做些關(guān)于納豆芽孢桿菌的實(shí)驗(yàn)，可否問你要這個(gè)菌種。謝謝啦。我準(zhǔn)備做點(diǎn)基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)，怕買來的活性不好，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，你這個(gè)經(jīng)常用的，效果應(yīng)該不會(huì)錯(cuò)的。如果不方便給，那我們一起交流探討可以嗎，謝謝，期待回復(fù)！

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10樓2013-08-23 10:32:14

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應(yīng)該和培養(yǎng)基配方有關(guān)�！�500ml三角瓶裝液量50ml-100ml”裝量太多了。

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12樓2015-07-03 09:53:32

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芽孢發(fā)酵劉

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裝液量少點(diǎn) 培養(yǎng)時(shí)間長點(diǎn) 實(shí)在還不長芽孢培養(yǎng)基成分減半

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13樓2016-01-23 14:30:06

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安子琪14樓

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