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fridayalicia新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
求助 MTT！��！
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俺第一次做MTT 出現(xiàn)了很?chē)宓膯?wèn)題 HepG2細(xì)胞 設(shè)立 陰性對(duì)照、 梯度濃度的利福平、 紅霉素組 培養(yǎng)24h后 陰性對(duì)照的數(shù)據(jù)居然顯著低于所有給藥組 啥情況啊? 怎么會(huì)給藥反而促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)了呢？ 另外之前看帖說(shuō)最好吸光值在0.1-0.7之間 我測(cè)出來(lái)的所有值都在1.0-1.7之間啊 是細(xì)胞長(zhǎng)得太密了么 還是什么原因？ 求各位大俠出手相助 小女子萬(wàn)分感激！！ 補(bǔ)充：藥是用DMSO溶的 給藥組和對(duì)照組都含0.1%的DMSO 另外我是把配好的5mg/ml的MTT先加到培養(yǎng)基中稀釋十倍，然后再給到每個(gè)孔的 這樣和每孔先各給20ul 5mg/ml的MTT 再補(bǔ)180ul的培養(yǎng)基 有區(qū)別么？ [ Last edited by fridayalicia on 2012-5-21 at 10:57 ] |
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9樓2012-05-23 14:56:42
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2樓2012-05-21 11:15:15
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【答案】應(yīng)助回帖
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zhaohq1209: 金幣+1, 鼓勵(lì)一下撒 2012-05-22 22:30:36
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zhaohq1209: 金幣+1, 鼓勵(lì)一下撒 2012-05-22 22:30:36
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陰性對(duì)照就是只加培養(yǎng)基不加藥的是吧？這個(gè)就太奇怪了 首先不是DMSO的問(wèn)題，0.5%的DMSO我都做過(guò)，沒(méi)有什么毒性 10000cell/mL也應(yīng)該沒(méi)有問(wèn)題，那我只能考慮是不是種板的時(shí)候你空白的那一行種稀了，實(shí)在是想不出更好的解釋 MTT不建議你那么加，倒不是說(shuō)哪里有問(wèn)題，我是沒(méi)見(jiàn)過(guò)這么混著加的，你還是直接加吧 至于吸光度的問(wèn)題，一般加藥孔不應(yīng)該過(guò)1，你要是覺(jué)得大了就早點(diǎn)加藥，不要等細(xì)胞長(zhǎng)得太滿(mǎn) 總之，給你的意見(jiàn)就是，接著做唄，什么實(shí)驗(yàn)都不會(huì)一次成功的，尤其是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。祝LZ好運(yùn) |
4樓2012-05-22 09:32:43
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