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shipolande新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
鄰苯二酚1,2，鄰苯二酚2,3雙加氧酶基因擴(kuò)增遇到大問(wèn)題·········
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| 本人最近做土壤中細(xì)菌鄰苯二酚1,2，鄰苯二酚2,3雙加氧酶基因擴(kuò)增，想PCR找出目的條帶，可是做了好久了一直沒(méi)有出現(xiàn)目的條帶，心情十分郁悶，一直P(pán)不出來(lái)，模板是土壤總DNA，引物是文獻(xiàn)上找的，條件也是參照文獻(xiàn)的，就是抑制P不出條帶，有哪位大俠做過(guò)的，給小弟一點(diǎn)點(diǎn)指點(diǎn)，本人就像做出點(diǎn)東西啊，可是自己知識(shí)面有限，經(jīng)驗(yàn)又少，望大蝦們給小弟點(diǎn)提示，在這感激不盡了啊······親 |
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2樓2012-05-22 08:37:12
shipolande
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3樓2012-05-23 10:49:55
4樓2012-05-23 18:40:46
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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對(duì)于功能基因從環(huán)境中擴(kuò)增確實(shí)很多時(shí)候是擴(kuò)增不出來(lái)的 這和你環(huán)境中的該基因的豐度有關(guān)，有些基因功能基因很好擴(kuò)增，而且多樣性也不錯(cuò)，如果你環(huán)境中該類(lèi)基因很少的話，它的多樣性也可能就是一兩個(gè)OTU的，你如果你一定要做的話，一個(gè)是你可以重復(fù)擴(kuò)增幾次，一次不行，可以兩次，三次。他們說(shuō)的富集的方法確實(shí)可行的，但可能不是你當(dāng)初設(shè)計(jì)試驗(yàn)的初衷。祝好 |
5樓2012-05-24 08:56:32
clx@6016
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6樓2012-05-26 08:11:58
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