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a317236770木蟲 (小有名氣)
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[求助]
考馬斯亮藍測蛋白質(zhì)
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1.考馬斯亮藍法測蛋白質(zhì)含量的發(fā)明者用牛血清蛋白作為標準蛋白質(zhì)溶液，我可以用待測液中的蛋白質(zhì)做標準液嗎？ 2.為什么要在595nm下測吸光度，不同蛋白質(zhì)染色后，最大吸收波長不會改變嗎？我的明膠溶液染色后掃描出最大吸收波長為585nm。 3.此方法的測定范圍是1--1000μg/ml，如果我要測定的溶液中蛋白質(zhì)含量超出此范圍，可以用蒸餾水直接稀釋到此范圍嗎？ [ Last edited by a317236770 on 2012-5-22 at 21:12 ] |
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colorfulmiao
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感謝參與，應助指數(shù) +1
a317236770: 金幣+8, ★★★★★最佳答案, 謝謝你的幫助！ 2012-05-25 14:58:46
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2 用595nm是因為考馬斯與蛋白結合后的最大吸收波長位于595 與考馬斯有關的 和蛋白影響不大 4. 黃原膠沒用過 但是你可以先用它與考馬斯試一下 1mL考馬斯加20uL黃原膠什么的 觀察顏色變化 如果顯著變色說明影響很大 5 不用緩沖鹽配制標準蛋白沒問題 我就是用純水配制的 緩沖溶液是起到保護蛋白的作用 但我測蛋白濃度時候樣品蛋白是用純水溶解的 因此標準蛋白也是純水溶解 看你的樣品中含有什么物質(zhì)了 標準蛋白一般都是配好分裝 -20℃保存 做一次拿一管用完用不完都扔掉 祝實驗成功~  |
9樓2012-05-25 11:16:33
silicare: 屏蔽內(nèi)容, 違規(guī)存檔 2012-07-12 09:34:17
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2樓2012-05-22 21:28:50
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10樓2012-05-25 16:51:57
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