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a317236770木蟲 (小有名氣)
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[求助]
考馬斯亮藍(lán)測(cè)蛋白質(zhì)
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1.考馬斯亮藍(lán)法測(cè)蛋白質(zhì)含量的發(fā)明者用牛血清蛋白作為標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)溶液，我可以用待測(cè)液中的蛋白質(zhì)做標(biāo)準(zhǔn)液?jiǎn)幔?br />
2.為什么要在595nm下測(cè)吸光度，不同蛋白質(zhì)染色后，最大吸收波長(zhǎng)不會(huì)改變嗎？我的明膠溶液染色后掃描出最大吸收波長(zhǎng)為585nm。 3.此方法的測(cè)定范圍是1--1000μg/ml，如果我要測(cè)定的溶液中蛋白質(zhì)含量超出此范圍，可以用蒸餾水直接稀釋到此范圍嗎？ [ Last edited by a317236770 on 2012-5-22 at 21:12 ] |
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【答案】應(yīng)助回帖
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a317236770: 金幣+8, ★★★★★最佳答案, 謝謝你的幫助！ 2012-05-25 14:58:46
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2 用595nm是因?yàn)榭捡R斯與蛋白結(jié)合后的最大吸收波長(zhǎng)位于595 與考馬斯有關(guān)的 和蛋白影響不大 4. 黃原膠沒(méi)用過(guò) 但是你可以先用它與考馬斯試一下 1mL考馬斯加20uL黃原膠什么的 觀察顏色變化 如果顯著變色說(shuō)明影響很大 5 不用緩沖鹽配制標(biāo)準(zhǔn)蛋白沒(méi)問(wèn)題 我就是用純水配制的 緩沖溶液是起到保護(hù)蛋白的作用 但我測(cè)蛋白濃度時(shí)候樣品蛋白是用純水溶解的 因此標(biāo)準(zhǔn)蛋白也是純水溶解 看你的樣品中含有什么物質(zhì)了 標(biāo)準(zhǔn)蛋白一般都是配好分裝 -20℃保存 做一次拿一管用完用不完都扔掉 祝實(shí)驗(yàn)成功~  |
9樓2012-05-25 11:16:33
silicare: 屏蔽內(nèi)容, 違規(guī)存檔 2012-07-12 09:34:17
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2樓2012-05-22 21:28:50
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