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[交流]
逆轉(zhuǎn)錄的時(shí)候體系要求RNA的最大量是 50ng/ul ，大于這個(gè)數(shù)會有什么樣的后果？？？ 已有3人參與
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請教一下各位高手。我在做逆轉(zhuǎn)錄的時(shí)候體系要求RNA的最大量是 50ng/ul ，但是加入的量卻遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于這個(gè)數(shù)。我想知道，如果是大于這個(gè)量是不是體系就不能逆轉(zhuǎn)了？還是超過這個(gè)最大限量，它也只是按50ng/ul進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄？？？？？ [ Last edited by wmjqy on 2012-5-29 at 00:30 ] |
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西瓜
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小丹木木: 金幣+2, 西瓜斑斑辛苦了 2012-05-27 17:32:01
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小丹木木: 金幣+2, 西瓜斑斑辛苦了 2012-05-27 17:32:01
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超過這個(gè)量，首先是反轉(zhuǎn)錄酶的能力有限，不能全部RNA都反轉(zhuǎn)錄，如果用來做定量，結(jié)果會不準(zhǔn)確（不能保證你需要的特定RNA全部被反轉(zhuǎn)錄了）。其次，如果加入的體積過大，提取RNA時(shí)殘留的一些試劑可能會影響酶活力。 不知道你的cDNA打算拿來做什么，如果是做PCR，那實(shí)在沒必要加過量的RNA啊。 |
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wmjqy2樓2012-05-25 20:33:49
3樓2012-05-27 00:38:47
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西瓜
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6樓2012-05-27 17:39:58
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