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cecilia533

新蟲 (小有名氣)

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專業(yè): 生物化學(xué)

[求助] 大腸桿菌周質(zhì)空間蛋白的提取

我使用分子克隆手冊上的方法提取周質(zhì)空間蛋白
即菌體加100微升細(xì)胞裂解液冰浴10min,離心得上清即為周質(zhì)空間蛋白。
其中細(xì)胞裂解液是：
1mg/ml lysozyme, 20% sucrose , 30mmol/l Tris-Cl(pH8.0), 1mM EDTA.
另外還用滲透壓休克法：菌體加100微升20%蔗糖30mMTris-Cl(pH8.0),1mM EDTA.冰浴30min,離心得菌體，加100微升30mMTris-Cl(pH8.0),30min后離心得上清（周質(zhì)空間蛋白）
這兩種方法都能把陰性對照中（也許是胞內(nèi)蛋白）提取出來，請問提周質(zhì)空間蛋白的關(guān)鍵是什么，為什么陰性對照我每次都能提出來蛋白來呢？有沒有什么好的提取方法？

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1樓 2012-05-28 20:29:02

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流水不爭

鐵桿木蟲 (正式寫手)

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回復(fù)此樓

2樓2017-02-10 21:48:00

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