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cecilia533新蟲 (小有名氣)
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[求助]
大腸桿菌周質(zhì)空間蛋白的提取
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我使用分子克隆手冊(cè)上的方法提取周質(zhì)空間蛋白 即菌體加100微升細(xì)胞裂解液冰浴10min,離心得上清即為周質(zhì)空間蛋白。 其中細(xì)胞裂解液是： 1mg/ml lysozyme, 20% sucrose , 30mmol/l Tris-Cl(pH8.0), 1mM EDTA. 另外還用滲透壓休克法：菌體加100微升20%蔗糖30mMTris-Cl(pH8.0),1mM EDTA.冰浴30min,離心得菌體，加100微升30mMTris-Cl(pH8.0),30min后離心得上清（周質(zhì)空間蛋白） 這兩種方法都能把陰性對(duì)照中（也許是胞內(nèi)蛋白）提取出來(lái)，請(qǐng)問(wèn)提周質(zhì)空間蛋白的關(guān)鍵是什么，為什么陰性對(duì)照我每次都能提出來(lái)蛋白來(lái)呢？有沒(méi)有什么好的提取方法？ |
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2樓2017-02-10 21:48:00
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