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zgzfei鐵桿木蟲(chóng) (正式寫手)
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[交流]
中藥單體在大鼠血漿中的代謝產(chǎn)物，LC/PDA/MS檢測(cè)
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| 我做的是中藥異黃酮在大鼠體內(nèi)代謝，灌胃給藥，血漿處理沉淀蛋白和固相萃取都做了，可血漿代謝物在質(zhì)譜上檢不出，只有一個(gè)高濃度的代謝產(chǎn)物可以明確檢測(cè)。選擇離子的時(shí)候，或者沒(méi)有峰或者與空白重合。在紫外下經(jīng)過(guò)放大還能看到幾個(gè)代謝物。有沒(méi)有哪位高手做過(guò)類似的實(shí)驗(yàn)，在這里分享下經(jīng)驗(yàn)吧！ |
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zgzfei(金幣+1): 謝謝參與
leecius: 金幣+1, 謝謝！ 2012-06-04 09:15:38
zgzfei(金幣+1): 謝謝參與
leecius: 金幣+1, 謝謝！ 2012-06-04 09:15:38
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不知道樓主用的MS是什么類型的~ 我們實(shí)驗(yàn)室在做代謝物推測(cè)的時(shí)候會(huì)用QTRAP~ 一開(kāi)始會(huì)先用MRM的方式，先推測(cè)一下可能的代謝物結(jié)構(gòu)及其碎片離子，然后用MRM方式掃描，這種方式的靈敏度很高~ MRM之外就是母離子掃描或者中性丟失掃描了~這個(gè)得根據(jù)你要測(cè)的母藥的結(jié)構(gòu)單獨(dú)討論。 還有一點(diǎn)想提醒樓主就是，體內(nèi)代謝很多會(huì)生成二相代謝產(chǎn)物，用質(zhì)譜檢測(cè)的時(shí)候，需要注意質(zhì)譜條件，太強(qiáng)烈的質(zhì)譜條件有可能破壞二相代謝產(chǎn)物…… |
7樓2012-05-30 09:38:00
zgzfei
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8樓2012-05-30 10:46:56
jwr
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11樓2012-06-03 09:14:26
caicaiseven
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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Q-TOF沒(méi)用過(guò)不太了解，我覺(jué)得直接用全掃描模式的話，會(huì)有很高的背景峰，有可能淹沒(méi)比較小的代謝物的峰。 我覺(jué)得，做代謝物鑒定，應(yīng)該是先從結(jié)構(gòu)和代謝途徑來(lái)推一下可能得代謝產(chǎn)物，然后再想辦法把這些代謝產(chǎn)物找出來(lái)驗(yàn)證。 此外，我聽(tīng)說(shuō)有個(gè)高分辨質(zhì)譜是有mass shift掃描的，不知道是哪個(gè)牌子了 = = 如果恰好是樓主用的那個(gè)，可以試試  比較強(qiáng)烈的質(zhì)譜條件可能破壞二相代謝產(chǎn)物一般是指高溫高電壓，有些葡萄糖醛酸化的產(chǎn)物有可能被打回一項(xiàng)產(chǎn)物，不過(guò)這個(gè)要根據(jù)化合物情況討論……  |
18樓2012-06-04 15:04:10
992523136
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4樓2012-05-29 17:01:35
liuguilin 
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5樓2012-05-29 17:09:10
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zgzfei(金幣+1): 謝謝參與
leecius: 金幣+1, 謝謝！ 2012-06-04 09:15:33
zgzfei(金幣+1): 謝謝參與
leecius: 金幣+1, 謝謝！ 2012-06-04 09:15:33
| 你不是能檢測(cè)到一個(gè)代謝產(chǎn)物嘛，當(dāng)然黃酮類成分在體內(nèi)代謝一般不止一個(gè)代謝產(chǎn)物，從你的紫外檢測(cè)也說(shuō)明了，你的結(jié)果說(shuō)明有幾個(gè)代謝產(chǎn)物，其中一個(gè)代謝產(chǎn)物濃度大，這個(gè)就很正常了。你的LC-MS沒(méi)檢測(cè)到另外幾個(gè)，那是說(shuō)明你的樣品處理問(wèn)題或者你的質(zhì)譜條件什么的，這個(gè)只能你自己解決了。按常規(guī)情況，沉淀蛋白有可能把你要測(cè)的目標(biāo)化合物沉淀掉，但你用SPE也沒(méi)檢測(cè)到，所以你的質(zhì)譜條件方面或色譜條件方面可能有問(wèn)題 |
6樓2012-05-30 07:35:00
zgzfei
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10樓2012-05-30 18:03:55
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19樓2012-06-04 15:22:04
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20樓2012-06-06 10:22:27
zgzfei
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24樓2013-07-02 21:37:35
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2012-05-29 16:56
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zgzfei(金幣+1): 謝謝參與
朱紅偉隨3樓
2012-05-29 16:59
回復(fù)
zgzfei(金幣+1): 謝謝參與
yingying158814樓
2012-06-03 21:21
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zgzfei(金幣+1): 謝謝參與
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