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[交流]
不熱激，可否轉(zhuǎn)化？ 已有14人參與
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 昨天轉(zhuǎn)化前，一走神，忘了熱激就搖上了。我一咬牙繼續(xù)做了，不知能否長(zhǎng)出來？ |
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 【分子生物】EPI帖 |
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dshlove
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小丹木木: 金幣+5, MolEPI+1, 專業(yè)，我也學(xué)習(xí)了 2012-06-04 16:31:36
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小丹木木: 金幣+5, MolEPI+1, 專業(yè)，我也學(xué)習(xí)了 2012-06-04 16:31:36
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你首先要明白熱激的原理。 在0 ℃的CaCl2 低滲溶液中，細(xì)菌細(xì)胞發(fā)生膨脹， Ca 2＋使細(xì)胞膜磷脂層形成液晶結(jié)構(gòu)，促使細(xì)胞外膜與內(nèi)膜間隙中部分核酸酶解離，誘導(dǎo)形成感受態(tài)。此外，Ca 2＋ 能與加入的DNA分子結(jié)合，形成抗脫氧核糖核酸酶的羥基－磷酸鈣復(fù)合物，黏附在胞膜的外表面；42 ℃熱激處理，菌體熱休克，細(xì)胞膜的液晶結(jié)構(gòu)發(fā)生擾動(dòng)，出現(xiàn)間隙。熱激后迅速轉(zhuǎn)移到冰上可以促使質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)移進(jìn)入胞內(nèi)。 樓上有人說熱激使細(xì)胞壁擴(kuò)張，我不敢茍同。 所以，我覺得，不大可能成功。 不過畢竟是革蘭氏陰性菌，細(xì)胞膜還不是密不透風(fēng)的，運(yùn)氣好的話，還是可能轉(zhuǎn)化成功的。 |
6樓2012-06-04 14:20:00
9樓2012-06-04 17:12:05
其實(shí)當(dāng)時(shí)我想重做的，但為了驗(yàn)證能否不熱激轉(zhuǎn)化，走完了全過程。10樓2012-06-04 20:20:08
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