| 7 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2327 | 回復(fù): 6 | ||
qurande金蟲 (小有名氣)
|
[求助]
關(guān)于畢赤酵母gs115可否用轉(zhuǎn)化化學(xué)轉(zhuǎn)化 已有1人參與
|
|
問題1,GS115能不能用化學(xué)轉(zhuǎn)化方法,用氯化鋰處理細(xì)胞制成感受態(tài),然后用鮭精NDA 試劑進(jìn)行轉(zhuǎn)化 2,我用的載體是pPIC9k,能否以非線性的狀態(tài)進(jìn)行化學(xué)轉(zhuǎn)化?若轉(zhuǎn)化的質(zhì)粒必須是線性的,那么化學(xué)轉(zhuǎn)化方法可以轉(zhuǎn)化線性的DNA么? |
木蟲 (著名寫手)
我們是糖 甜到憂傷

木蟲 (著名寫手)
木蟲 (小有名氣)
木蟲 (著名寫手)
我們是糖 甜到憂傷

|
您好,我還有幾個問題想請教您一下,麻煩您了,謝謝 我用的是畢赤酵母GS115和KM71,載體是PIC3.5K,線性化酶是SacI 1. 電轉(zhuǎn)后直接涂加YNB、生物素和葡萄糖的MD板就可以了嗎?長出來的是不是就是陽性克隆子? 2. 轉(zhuǎn)化后我看手冊上說GS115是mut+型,而KM71是muts型?那還用不用進(jìn)一步進(jìn)行分型鑒定了?用必要? 3. 有必要進(jìn)行多拷貝數(shù)的篩選嗎? 4.我準(zhǔn)備進(jìn)行不同梯度的篩選,G418的濃度分別是0.5,1,2,4.有必要這樣分嗎?還是直接選一個濃度梯度就行了? 5. 保存菌種的時候,收集菌以后直接由PYD重懸至OD-50-100,然后加80%的甘油至終濃度為15%可以嗎? 6. 做多拷貝數(shù)克隆子篩選的時候,G418是制平板的時候加進(jìn)去的還是做好平板,在用之前涂上去的?,要涂得話應(yīng)該怎么操作?謝謝 7. 做PCR鑒定的時候能不能用菌落PCR?引物用我的特異性引物可以嗎? 期待您的回復(fù)! 我剛開始做,一些基本的問題都搞不明白,希望您多多指教!多給我講點東西,謝謝 |

新蟲 (初入文壇)
| 7 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 281求調(diào)劑(0805) +6 | 煙汐憶海 2026-03-16 | 16/800 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿華中科技大學(xué),080502,354分求調(diào)劑 +4 | 守候夕陽CF 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +6 | lemonzzn 2026-03-16 | 9/450 |
|
|
[考研] 08工科 320總分 求調(diào)劑 +5 | 梨花珞晚風(fēng) 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
[考研] 297求調(diào)劑 +8 | 戲精丹丹丹 2026-03-17 | 8/400 |
|
|
[考研] 材料專碩274一志愿陜西師范大學(xué)求調(diào)劑 +6 | 薛云鵬 2026-03-13 | 6/300 |
|
|
[考研] 工科材料085601 279求調(diào)劑 +6 | 困于星晨 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
[碩博家園] 湖北工業(yè)大學(xué) 生命科學(xué)與健康學(xué)院-課題組招收2026級食品/生物方向碩士 +3 | 1喜春8 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
[考研] 0703一志愿211 285分求調(diào)劑 +5 | ly3471z 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
[考研] 070300化學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +6 | 太想進(jìn)步了0608 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
[考研] 070303 總分349求調(diào)劑 +3 | LJY9966 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
[考研]
|
笨笨兔子 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
[考研] 中科大材料專碩319求調(diào)劑 +3 | 孟鑫材料 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
[考研] 297一志愿上交085600求調(diào)劑 +5 | 指尖八千里 2026-03-14 | 5/250 |
|
|
[考研] 一志愿哈工大材料324分求調(diào)劑 +5 | 閆旭東 2026-03-14 | 5/250 |
|
|
[考研] 材料080500調(diào)劑求收留 +3 | 一顆meteor 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +3 | 冬十三 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
[碩博家園] 085600 260分求調(diào)劑 +3 | 天空還下雨么 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +4 | 芬達(dá)46 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | 程雨杭 2026-03-12 | 3/150 |
|