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xiacongmin金蟲 (小有名氣)
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[求助]
F-7000 日立熒光分光光度計(jì)：關(guān)于時(shí)間掃描模式，熒光值不穩(wěn)定的原因的問題
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我現(xiàn)在正在用日立的F-7000來檢測伏馬毒素，伏馬毒素本身沒有熒光，用OPA試劑衍生后再來測，但衍生后的化合物不穩(wěn)定，熒光會(huì)隨著時(shí)間衰減。 伏馬毒素是溶于乙腈：水=1：1的溶液中的。所以我配制了一系列濃度的伏馬毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液，空白是乙腈水（因?yàn)榭瞻着cOPA試劑衍生后也有熒光，但低于系列濃度的伏馬毒素衍生后的熒光值）。然后對(duì)分別空白和系列濃度的伏馬毒素衍生后進(jìn)行時(shí)間掃描。分別計(jì)算前30S的熒光平均值，再繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 問題是每次的的標(biāo)準(zhǔn)曲線結(jié)果都比較好（相關(guān)系數(shù)能到0.99以上，），但是每天和每天測的熒光值有一定差別，就是曲線方程不一樣。 這是因?yàn)槭怯邢到y(tǒng)誤差呢？還是熒光受條件因素較多，所以每次的都不一樣呢？ 還有就是我應(yīng)該怎樣來調(diào)零和扣除空白呢？ 時(shí)間掃描模式下有必要調(diào)零和扣除空白嗎？ |
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2樓2012-06-04 10:02:10
xiacongmin
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8樓2015-04-10 17:27:55
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