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qiannianchao金蟲 (初入文壇)
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SOE pcr目的條帶很暗,非特異條帶很亮?
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引物12:1000bp左右; 引物34:500bp左右; 重疊部分長度:40bp左右; 反應(yīng)條件:50-52℃退火45s,延伸7min,一開始10-15個循環(huán),然后加了1和4引物,30-40個循環(huán); 得到的電泳結(jié)果總是:出現(xiàn)非特異性條帶,大小600bp左右,而且很亮!但是目的條帶處卻很暗,無法回收。 請教高手這種情況是什么原因造成的,需要怎么樣改善,在線等待。。 |
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