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EbbE820金蟲 (小有名氣)
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[求助]
熒光儀測出的波長與液相上使用的波長不一致
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本人做某物質(zhì)A的高效液相-熒光檢測，參考文獻中物質(zhì)A的最大激發(fā)和發(fā)射波長分別是273和414 nm，我用高效液相熒光檢測時如參考文獻所設(shè)置，得到的色譜峰與紫外對比有明顯增強。但是我用LS-55掃描的結(jié)果是最大激發(fā)和發(fā)射波長在331和395nm，在273 nm和414 nm幾乎沒有峰值；在液相上設(shè)置激發(fā)波長為314，發(fā)射波長為414 nm時，得到的峰明顯比273的小。請問這是為什么呢？還望高人指點。 由于剛接觸LS-55熒光儀，也不知道是不是自己操作有問題，因為我用的流動相是甲醇和水，所以樣品是用甲醇配的，用LS-55測光譜操作如下 1.固定發(fā)射波長414，掃描純甲醇的激發(fā)譜，當做空白 2.待測樣品扣除1，得到激發(fā)光譜，激發(fā)峰值在331 nm 但是在激發(fā)峰后出現(xiàn)一個倒峰，對比空白發(fā)現(xiàn)是在發(fā)射波長414nm處（1 空白在414nm處有個很大的峰） 3.固定激發(fā)波長331 nm，掃描純甲醇的發(fā)射譜，當做空白 4. 待測光譜扣除3，得到發(fā)射光譜，峰值在395nm |
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 紫外熒光 |
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manengxuan
木蟲 (小有名氣)
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2樓2012-06-12 15:19:53
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4樓2012-06-12 21:30:43
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