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EbbE820金蟲 (小有名氣)
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[求助]
熒光儀測(cè)出的波長與液相上使用的波長不一致
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本人做某物質(zhì)A的高效液相-熒光檢測(cè)，參考文獻(xiàn)中物質(zhì)A的最大激發(fā)和發(fā)射波長分別是273和414 nm，我用高效液相熒光檢測(cè)時(shí)如參考文獻(xiàn)所設(shè)置，得到的色譜峰與紫外對(duì)比有明顯增強(qiáng)。但是我用LS-55掃描的結(jié)果是最大激發(fā)和發(fā)射波長在331和395nm，在273 nm和414 nm幾乎沒有峰值；在液相上設(shè)置激發(fā)波長為314，發(fā)射波長為414 nm時(shí)，得到的峰明顯比273的小。請(qǐng)問這是為什么呢？還望高人指點(diǎn)。 由于剛接觸LS-55熒光儀，也不知道是不是自己操作有問題，因?yàn)槲矣玫牧鲃?dòng)相是甲醇和水，所以樣品是用甲醇配的，用LS-55測(cè)光譜操作如下 1.固定發(fā)射波長414，掃描純甲醇的激發(fā)譜，當(dāng)做空白 2.待測(cè)樣品扣除1，得到激發(fā)光譜，激發(fā)峰值在331 nm 但是在激發(fā)峰后出現(xiàn)一個(gè)倒峰，對(duì)比空白發(fā)現(xiàn)是在發(fā)射波長414nm處（1 空白在414nm處有個(gè)很大的峰） 3.固定激發(fā)波長331 nm，掃描純甲醇的發(fā)射譜，當(dāng)做空白 4. 待測(cè)光譜扣除3，得到發(fā)射光譜，峰值在395nm |
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 紫外熒光 |
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manengxuan
木蟲 (小有名氣)
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
EbbE820: 金幣+2, ★有幫助, 謝謝交流哦~ 2012-06-12 16:17:22
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我也遇到過同樣的問題 首先，文獻(xiàn)值不可盡信，你還是自己做一遍比較好，做熒光時(shí)由于溶劑，濃度還有狹縫等儀器參數(shù)的設(shè)置不同，得到的結(jié)果就可能會(huì)不一樣。 其次，我做的物質(zhì)在其他條件均一樣的情況下，以甲醇做溶劑比以水做溶劑的熒光強(qiáng)度明顯要大，我認(rèn)為是甲醇具有增強(qiáng)熒光的作用，有關(guān)于甲醇在這方面的文獻(xiàn) 希望與樓主探討  |
2樓2012-06-12 15:19:53
EbbE820
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3樓2012-06-12 16:20:24
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4樓2012-06-12 21:30:43
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