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472263516新蟲 (小有名氣)
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[求助]
硅膠柱的選擇
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我要用硅膠柱分離脂肪,查到的文獻是用20mm(內(nèi)徑)*300mm(柱長)的柱子或者40*600的柱子。 請問我可以用25*400的柱子嗎?最好能解釋一下原因 謝謝! |
木蟲 (小有名氣)
科研小丑
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我之前做的與你的還有一定區(qū)別,一些看法也不一定對,僅供參考: 1加入氯仿是為了降低有的粘度,確保油能夠完全轉(zhuǎn)移到柱中,我做的是1g油加了5ml溶劑,然后再洗滌兩次。如果油多,可以降低溶劑比例,達到轉(zhuǎn)移到柱中的目的就好。估計你已經(jīng)看過GB5009.202-2003,可參考。 2我做的是相切時加。 3我加的海沙,無水硫酸鈉也好,還能除水。我是在裝柱的時候加的,大約0.5mm吧。我不知道你是怎么裝柱的,如果是濕裝柱,硅膠沉淀后柱中還會有溶劑的,這時候加上硫酸鈉,敲實就ok了。 4這個問題我不很清楚。你在用氯仿洗脫時極性物質(zhì)會下來嗎?你可以試一下分段收集,然后每段用TLC試試。 ps:你這個實驗會很費勁的,祝你好運。 |

木蟲 (小有名氣)
科研小丑

新蟲 (小有名氣)
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感謝幫助,我還有幾個問題,希望能得到你的幫助。 我的目的是將提取的油分為中性脂肪和極性脂肪,中性脂肪用氯仿洗脫,極性用甲醇洗脫,分別回收后下一步試驗。 1你建議油用少量氯仿溶解?少量是多少,大概比例多少? 2什么時候上樣?是洗脫液離硅膠面1-2cm高時還是洗脫液剛好完全進入液面時上樣? 3我看到有人建議說為了不把柱子表面沖壞,建議在表層加無水硫酸鈉或者海沙,那么請問什么時候加,怎么加,加的時候難道不怕把柱子沖壞嗎?加的高度是多少? 4最頭疼的一個問題是如何判斷中性脂肪或者極性脂肪已經(jīng)完全被洗脫下來了?做TLC需要標樣吧,可是中性脂肪和極性脂肪是個混合物。 期待回復 |
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