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472263516新蟲 (小有名氣)
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[求助]
硅膠柱的選擇
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我要用硅膠柱分離脂肪，查到的文獻(xiàn)是用20mm（內(nèi)徑）*300mm（柱長）的柱子或者40*600的柱子。 請問我可以用25*400的柱子嗎？最好能解釋一下原因 謝謝！ |
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reasong
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2樓2012-06-14 10:11:43
472263516
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感謝幫助，我還有幾個問題，希望能得到你的幫助。 我的目的是將提取的油分為中性脂肪和極性脂肪，中性脂肪用氯仿洗脫，極性用甲醇洗脫，分別回收后下一步試驗。 1你建議油用少量氯仿溶解？少量是多少，大概比例多少？ 2什么時候上樣？是洗脫液離硅膠面1-2cm高時還是洗脫液剛好完全進(jìn)入液面時上樣？ 3我看到有人建議說為了不把柱子表面沖壞，建議在表層加無水硫酸鈉或者海沙，那么請問什么時候加，怎么加，加的時候難道不怕把柱子沖壞嗎？加的高度是多少？ 4最頭疼的一個問題是如何判斷中性脂肪或者極性脂肪已經(jīng)完全被洗脫下來了？做TLC需要標(biāo)樣吧，可是中性脂肪和極性脂肪是個混合物。 期待回復(fù) |
3樓2012-06-15 17:15:48
reasong
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【答案】應(yīng)助回帖
樹樹8013: 食品EPI+1, 謝謝對問題的持續(xù)關(guān)注，食品EPI一枚，請繼續(xù)關(guān)注食品板塊。 2012-06-16 20:29:34
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我之前做的與你的還有一定區(qū)別，一些看法也不一定對，僅供參考： 1加入氯仿是為了降低有的粘度，確保油能夠完全轉(zhuǎn)移到柱中，我做的是1g油加了5ml溶劑，然后再洗滌兩次。如果油多，可以降低溶劑比例，達(dá)到轉(zhuǎn)移到柱中的目的就好。估計你已經(jīng)看過GB5009.202-2003，可參考。 2我做的是相切時加。 3我加的海沙，無水硫酸鈉也好，還能除水。我是在裝柱的時候加的，大約0.5mm吧。我不知道你是怎么裝柱的，如果是濕裝柱，硅膠沉淀后柱中還會有溶劑的，這時候加上硫酸鈉，敲實就ok了。 4這個問題我不很清楚。你在用氯仿洗脫時極性物質(zhì)會下來嗎？你可以試一下分段收集，然后每段用TLC試試。 ps：你這個實驗會很費(fèi)勁的，祝你好運(yùn)。 |
4樓2012-06-16 16:59:55
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