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生物樣品前處理問題
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最近做藥動,對于樣品前處理的沉淀蛋白法不太理解。用與水項混溶的有機溶劑沉淀蛋白時,比如說用乙腈,我取500ul血漿,加入500ul乙腈,渦旋離心后要取上清進樣,但是上清的總體積我不知道,取一定量上清進樣的話,提取回收率該怎么算呢?上清液的總體積用不用知道呢?請高手指點迷津。 例:取肝素抗凝血漿600uL,置10mL具塞離心試管中,依次加入內標溶液50ul和乙腈3mL,渦旋混合,離心,分取上清,于40℃氮氣流下吹干,殘渣加入流動相80ul,渦旋,高速 離心(16000rpm/min)10min,取上清液20uL,注入高效液相色譜儀。 這個過程中“分取上清”是把上清液完全取出嗎?并且要確定總的上清量嗎?如果不是的話,那提取回收率該怎么算呢? |
木蟲 (著名寫手)
金蟲 (小有名氣)
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