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love04love07鐵蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
求助:圖位克隆最后測(cè)序階段的問(wèn)題
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前段做水稻一個(gè)基因的精細(xì)定位,已經(jīng)將該基因定位到140KB。目前正在進(jìn)行測(cè)序工作,其中遇到了好多困難,請(qǐng)各位幫幫忙吧,小弟在此謝過(guò)了。 1、群體有兩千多,而且離著絲點(diǎn)不算近,但是卻只能定到140KB,是不是和雜交的品種有關(guān)系? 2、如何測(cè)序更效率高?我們現(xiàn)在是做兩管PCR,大小在800bp左右,一管測(cè)正向,一管測(cè)反向。聽(tīng)別人說(shuō)可以幾管混起來(lái)測(cè),不知道哪個(gè)更準(zhǔn)確呢? 3、我們目前測(cè)序是按NCBI的預(yù)測(cè)序列,但是又發(fā)現(xiàn)gramene里面的預(yù)測(cè)和NCBI有很大出入,不知道該以哪個(gè)為準(zhǔn)? |
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銅蟲(chóng) (初入文壇)
榮譽(yù)版主 (知名作家)
海納百川

金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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