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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 【求助/交流】ITS測序
| 查看: 2368 | 回復: 17 | ||||
xclj369ouc金蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】ITS測序 已有13人參與
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請教大家誰有測過ITS序列？ 是直接PCR產(chǎn)物測序的，還是克隆測序的�。� |
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小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖交流
reasonspare(金幣+1):謝謝分享。 2010-06-23 06:04:53
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖交流
reasonspare(金幣+1):謝謝分享。 2010-06-23 06:04:53
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首先轉(zhuǎn)錄酶有很多種，雖然準確度很高，但是擴增產(chǎn)物多，即使是一億分之一的出錯率，也會有極少數(shù)堿基出錯。 連接到載體上之后轉(zhuǎn)化宿主，在宿主體內(nèi)擴增的過程中，由一個拷貝增加到億個拷貝，宿主的擴增系統(tǒng)會產(chǎn)生極少數(shù)堿基出錯。 宿主郵寄到測序公司后進行擴增提取質(zhì)粒，質(zhì)粒又進行多次擴增，也可能出錯。當然也可以用菌體PCR，不過難度明顯比用質(zhì)粒為模板高。 這下應該明白我為什么用PCR產(chǎn)物來測序了吧？ |
10樓2010-05-09 21:50:11
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