xiajuan9

嗯，之前有摸條件，用的是整合型質(zhì)粒pMT3，能夠轉(zhuǎn)進(jìn)去，雖然效率不高，但是能長(zhǎng)出轉(zhuǎn)化子。后來(lái)就怎么也轉(zhuǎn)化不成功，嘗試過(guò)降熱激溫度降低為42度，15min及45度10min，孢子復(fù)蘇時(shí)間延長(zhǎng)6小時(shí)以上，甚至換過(guò)復(fù)蘇液。均沒(méi)效果。怎么辦？還可以從哪些方面可以改進(jìn)呢？

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5樓2012-07-04 21:19:00

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doriscc

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孢子的量和大腸桿菌的狀態(tài)也很重要，OD值最好到0.4，我們做的高一點(diǎn)也沒(méi)有關(guān)系，再把孢子的量提高一些~~祝好

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6樓2012-07-05 21:45:45

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果子么么茶

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zhang8826857: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流 2012-07-06 21:47:14

我做的50℃熱激10min 1h內(nèi)與洗滌好的大腸混勻涂布 18h后涂萘啶酮酸和抗生素
我覺(jué)得涂抗生素的時(shí)間也很重要孢子濃度大腸濃度很重要
ps 會(huì)不會(huì)孢子活性不行

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7樓2012-07-05 22:01:09

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xiajuan9

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我用顯微鏡觀(guān)察了孢子形態(tài)，總覺(jué)得沒(méi)有萌發(fā)，熱激之后多長(zhǎng)時(shí)間混勻比較合適呢？

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8樓2012-07-06 21:03:01

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lmhzy1987

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引用回帖:

8樓: Originally posted by xiajuan9 at 2012-07-06 21:03:01
我用顯微鏡觀(guān)察了孢子形態(tài)，總覺(jué)得沒(méi)有萌發(fā)，熱激之后多長(zhǎng)時(shí)間混勻比較合適呢？

我個(gè)人覺(jué)得你孢子沒(méi)萌發(fā)還是孢子不大新鮮的原因，熱激通常涼了之后就該混勻了啊

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頭疼的文庫(kù)

9樓2012-07-07 14:16:56

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xiajuan9

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我們老師總說(shuō)要萌發(fā)什么的，費(fèi)解。還有熱激溫度問(wèn)題，

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10樓2012-07-07 19:38:25

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