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我想做苜蓿抗熱基因這一方面，但是現(xiàn)在思緒很亂，不知道從何入手，望高手指點
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| 我想做苜�？篃峄蜻@一方面，但是現(xiàn)在思緒很亂，不知道從何入手，望高手指點 |
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【答案】應助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+3, 很熱心的蟲蟲 2012-06-26 16:41:36
感謝參與，應助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+3, 很熱心的蟲蟲 2012-06-26 16:41:36
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你師兄消減雜交得到的cDNA就是苜蓿分別在高溫和常溫兩種條件下差異表達的cDNA了吧？如果是這樣的話接下來應該就如3L、4L所說那樣做了，值得注意的是拿到感興趣的cDNA片段序列后既可以用race拉基因全長，也可以根據(jù)EST信息拼基因全長，不過通常前者更可靠。 得到幾個你認為可能的候選基因后可以先做做southern和real time PCR，驗證該基因到底是不是在高溫時特異表達及表達量有何變化等； 接下來就是轉基因了，能轉苜蓿最好，不能的話就只好轉模式植物，轉后同樣需要用southern或real time PCR等手段驗證基因的表達，若是表達的話再進行表型驗證（就是看它到底是不是比一般的更耐熱）。 想做得深點還可以把相應的蛋白質給找出來神馬的…… ps：我沒做過該實驗，以上內容僅供參考。 |
7樓2012-06-25 22:58:19
8樓2012-06-26 15:09:03
9樓2012-06-26 15:09:20
10樓2012-06-26 15:09:34
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