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yqs129219

新蟲 (小有名氣)

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[求助] RNA上樣量的問(wèn)題已有1人參與

1：求教一般RNA上樣量為多少ng，RNA濃度計(jì)算=OD260x稀釋倍數(shù)x40/1000單位是ug/ml，不就是ng/ul么？求教是否正確
2：另外求教RNA電泳用變性膠最好么？好像比較麻煩。TAE可以把？

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【求助/交流】有關(guān) RNA 的問(wèn)題已經(jīng)有16人回復(fù)

1樓 2012-06-26 21:31:11

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julin1002

新蟲 (初入文壇)

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小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 2012-06-27 13:39:56

我們一般上樣700-800ng/ul，檢測(cè)RNA的質(zhì)量跑瓊脂糖凝膠電泳即可，可以分析跑出條帶的峰型，看有無(wú)基因組和蛋白或者下分子多分多糖的影響

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4樓2012-06-27 09:24:27

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longrna

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【答案】應(yīng)助回帖

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小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)應(yīng)助 2012-06-27 13:39:39

1、小孔的梳子上樣100-200ng；中孔的可以上樣400-500ng。A260X40X稀釋倍數(shù)即為濃度了吧，單位ng/ul(=ug/ml)。
2、變性膠較好，不過(guò)麻煩，跑變性膠可以避免電泳過(guò)程的降解。一般的檢測(cè)跑普通的瓊脂糖凝膠即可。TAE、TBE均可。

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2樓2012-06-27 08:47:57

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dafeizizhu

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小丹木木: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流 2012-06-27 13:39:49

如果不是實(shí)驗(yàn)的特殊要求，只是為了看看提取的RNA是否好，就跑個(gè)普通的瓊脂糖凝膠電泳就可以，1%的。我提取的RNA大概是500ng/ul，點(diǎn)樣5ul。

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3樓2012-06-27 09:12:11

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引用回帖:

2樓: Originally posted by longrna at 2012-06-27 08:47:57
1、小孔的梳子上樣100-200ng；中孔的可以上樣400-500ng。A260X40X稀釋倍數(shù)即為濃度了吧，單位ng/ul(=ug/ml)。
2、變性膠較好，不過(guò)麻煩，跑變性膠可以避免電泳過(guò)程的降解。一般的檢測(cè)跑普通的瓊脂糖凝膠即可。TAE、 ...

網(wǎng)上很多濃度計(jì)算都有寫那個(gè)除以1000的

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5樓2012-06-27 15:52:55

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