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sk_yb新蟲 (小有名氣)
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[求助]
β半乳糖苷酶活性 和RT-PCR
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請(qǐng)問(wèn)各位: β半乳糖苷酶活性來(lái)檢測(cè)啟動(dòng)子活性是不是也反映了目的基因的表達(dá)情況? β半乳糖苷酶活性 和RT-PCR 檢測(cè)基因表達(dá)有什么不同,都是在什么時(shí)候使用呢? 謝謝大家 |
木蟲 (正式寫手)

| 用報(bào)告基因和RT來(lái)檢測(cè)啟動(dòng)子的強(qiáng)度都是可以的。mRNA半衰期很短,蛋白相對(duì)mRNA是穩(wěn)定的存在,酶活的強(qiáng)弱是積累的過(guò)程。但蛋白的活性除了轉(zhuǎn)錄的影響還涉及到翻譯的效率。而RT主要是測(cè)你收菌那個(gè)時(shí)間點(diǎn)的mRNA的含量。所以要看你的實(shí)驗(yàn)?zāi)康,如果是做mRNA的相關(guān)的,最好做RT,如果是為了看表達(dá)蛋白的強(qiáng)弱,用報(bào)告基因會(huì)更好點(diǎn)。 |
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