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[求助]
發(fā)酵產(chǎn)物HPLC結(jié)果分析
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最近做的一批發(fā)酵貌似終于有了目的產(chǎn)物，但是HPLC的結(jié)果圖不是很會(huì)看，跑了兩次目的峰的出峰時(shí)間基本一致，下面就是我的HPLC圖譜，上圖是我的標(biāo)準(zhǔn)品，出峰時(shí)間為12.895min，下圖是樣品，出峰時(shí)間是12.909min，樣品的峰很低，我不知道這個(gè)峰能不能算是特征峰，這個(gè)面積應(yīng)該是從基線開始算還是從峰的尖角開始算，請大家指點(diǎn)，謝謝 標(biāo)準(zhǔn)品 樣品 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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lgs1: 金幣+1 2012-07-01 14:37:51
lgs1: 金幣+1, ★有幫助 2012-07-01 14:38:05
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lgs1: 金幣+1, ★有幫助 2012-07-01 14:38:05
| 小清新，如果你的發(fā)酵液密密麻麻的峰把整個(gè)時(shí)間軸的占滿了，然后你用其中一個(gè)時(shí)間點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)物去對(duì)，那當(dāng)然回游一個(gè)峰重疊不是嗎？我個(gè)人覺得你首先得先去下雜質(zhì)，然后上液相看峰是不是都分開了，然后變化hplc條件，看你的峰和標(biāo)準(zhǔn)物是不是每次條件都能重疊，這樣可能性就很大了！接著將該峰收集純化（不純化也行），然后去打個(gè)質(zhì)譜，看分子量是不是相同，這樣基本就差不多能確定了！祝你好運(yùn)~~~ |
5樓2012-06-28 14:58:51
hehongyu
木蟲 (正式寫手)
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ltx0744624
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susizheng
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8樓2012-06-29 15:52:46
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
lgs1: 金幣+1, ★★★很有幫助 2012-07-01 14:40:19
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
lgs1: 金幣+1, ★★★很有幫助 2012-07-01 14:40:19
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1、你樣品進(jìn)液相時(shí)，應(yīng)該是進(jìn)了氣泡，基線有很大的偏差，需要將基線走平后再進(jìn)樣。流動(dòng)相需要30分鐘超聲除氣，走基線時(shí)也要經(jīng)常除氣。 2、你樣品進(jìn)樣前需要用三氯乙酸除蛋白。 3、標(biāo)準(zhǔn)品和樣品進(jìn)樣時(shí)間不要間隔太久，溫度對(duì)出峰時(shí)間有影響。 4、主峰出峰時(shí)間有少量的偏差是正常的。  |
9樓2012-06-29 17:01:38
10樓2012-07-01 14:44:42
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