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hbaocheng新蟲 (初入文壇)
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[求助]
活性污泥中硝酸還原酶和亞硝酸還原酶測定方法 已有2人參與
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各位蟲友： 小弟想測定一下反應器中的污泥的硝酸還原酶和亞硝酸還原酶的活性。采用的方法是EST上某篇文章中的方法。具體操作過程是： 1.酶提取 取2ml污泥，用0.01M的磷酸緩沖液（pH為7.4）沖洗3次，然后在20kHZ、4℃下超聲破碎5min，破碎結束后再12000rpm、4℃下離心10min取上清液，即制得粗酶液。 2. 酶活性測定 在一干凈的試管中加入適量磷酸緩沖液(pH7.4)，NaNO3或NaNO2、甲基紫精、Na2S2O4至2 mL，它們的最終濃度為0.01M、1mM、1mM、1mM、5mM。加入300uL步驟1制取的粗酶液。然后將試管溫度維持在30℃下反應30min。測定亞硝酸鹽的增加量來表示硝酸還原酶的活性(NR)，或者測定亞硝酸鹽的減少量來表示亞硝酸還原酶的活性(NIR)。硝酸還原酶的活性用umol NO2--N/(min•mg蛋白質)表示，亞硝酸還原酶的活性用umol NO2--N/(min•mg蛋白質)。 我用這個方法反復取樣測定了好多次了，即使水浴了5h，也不見有明顯的硝酸鹽或者亞硝酸鹽的還原。這個到底是怎么回事。不知有高手可給小弟解惑。是體系不對麼？ 或者如果哪位大蝦有比較好的測定方法，也可以給小弟推薦一下。發(fā)郵箱也行的，hbaocheng@163.com 真的是不勝感激啊，小弟最近為這事兒都急死了，一直就測不出來，實驗受挫啊，老板又該說了。。。。 |
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 污水處理 |
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9樓2016-03-10 08:03:20
hbaocheng
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3樓2012-06-30 14:18:12
4樓2012-07-16 10:24:31
hbaocheng
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完全沒有。。。 沒人關注啊，貌似。。。。 5樓2012-07-16 14:49:57
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