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lihao1988903金蟲 (正式寫手)
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[求助]
關(guān)于噬菌體侵染細(xì)菌
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| 最近做的兩次微生物發(fā)酵罐發(fā)酵都被噬菌體侵染了。我們做的是30L 大腸桿菌發(fā)酵,接種到發(fā)酵罐一切正常,菌種生長(zhǎng)到一定OD后,溶氧就急劇上升并OD下降到1一下,菌液變清亮。因?yàn)榈谝淮挝廴竞髮iT對(duì)環(huán)境和設(shè)備又做了次消毒處理,結(jié)果第二次還是污染了。我想請(qǐng)問(wèn)各位大蝦,噬菌體會(huì)在什么時(shí)候侵染了大腸桿菌?侵染了大腸桿菌后多長(zhǎng)時(shí)間才會(huì)釋放出來(lái)使OD下降?因?yàn)榻臃N以后,發(fā)酵罐沒(méi)有開過(guò)口,會(huì)被污染嗎?如果是濾器進(jìn)去的為啥剛接種是沒(méi)有呢?各位大蝦分析下是什么時(shí)候被污染噬菌體的呢? |
用戶注銷 (知名作家)
金蟲 (正式寫手)
小魚兒
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首先我建議你不能這么武斷的認(rèn)為是噬菌體。接種的時(shí)候接種口用棉花蘸酒精點(diǎn)燃,然后接種。生長(zhǎng)到OD值還沒(méi)有下降,或者剛剛下降不久馬上進(jìn)行一次補(bǔ)料,補(bǔ)料后觀察OD值是否繼續(xù)下降,補(bǔ)料的培養(yǎng)基是很濃的,控制好體積,并滅好菌。補(bǔ)料后如果發(fā)現(xiàn)OD值只有少量上升,并且沒(méi)維持多久就繼續(xù)飛速下降那么就可能是污染了,補(bǔ)料后OD值上升,溶解氧下降,稱現(xiàn)一定規(guī)律,則表明之前是培養(yǎng)基耗盡。 如果證明了有很大可能是污染為了確認(rèn),你可以先用沒(méi)有污染的菌做涂布,菌濃度大培養(yǎng)使得形成菌苔,然后在菌苔表面涂幾個(gè)點(diǎn)(用接種環(huán))的懷疑污染了的培養(yǎng)基,培養(yǎng),看看是否會(huì)出現(xiàn)溶菌現(xiàn)象。(既原來(lái)看到完整的菌苔,在接種后出現(xiàn)了空的溶菌斑)如果出現(xiàn)了溶菌現(xiàn)象則確實(shí)證明了是噬菌體。如果是噬菌體的話就比較討厭了。需要對(duì)所有可能的物品進(jìn)行消毒。(不是滅菌)包括房間,容器,器皿等等。 |
銅蟲 (正式寫手)
| ,你可以先用沒(méi)有污染的菌做涂布,菌濃度大培養(yǎng)使得形成菌苔,然后在菌苔表面涂幾個(gè)點(diǎn)(用接種環(huán))的懷疑污染了的培養(yǎng)基,培養(yǎng),看看是否會(huì)出現(xiàn)溶菌現(xiàn)象。(既原來(lái)看到完整的菌苔,在接種后出現(xiàn)了空的溶菌斑)如果出現(xiàn)了溶菌現(xiàn)象則確實(shí)證明了是噬菌體。如果是噬菌體的話就比較討厭了。需要對(duì)所有可能的物品進(jìn)行消毒。(不是滅菌)包括房間,容器,器皿等等。 |
銅蟲 (正式寫手)
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